便秘的定義：美國胃腸病學(xué)會（2005年）將便秘定義為“排便不滿意，排便不暢、排便困難或兩者兼而有之。排便困難包括用力、排便困難感、排便不完全、大便硬/塊狀、排便時間延長。慢性便秘被定義為這些癥狀持續(xù)至少三個月。便秘是帕金森病(PD)的主要致殘非運動癥狀之一，已成為是帕金森病公認(rèn)的癥狀，并且被證明甚至先于運動癥狀，而且每周排便次數(shù)和便秘的嚴(yán)重程度被發(fā)現(xiàn)與發(fā)展為PD的風(fēng)險相關(guān)。便秘作為PD危險因素的作用似乎證實了Braak型中關(guān)于PD路易病理學(xué)的病理動力學(xué)模型，甚至在黑質(zhì)退化之前腸神經(jīng)系統(tǒng)和迷走神經(jīng)背側(cè)運動核(DMV)就已早期受累開始。在PD中，便秘主要是由于結(jié)腸轉(zhuǎn)運緩慢或恥骨直腸肌協(xié)同失調(diào)，但同時使用抗帕金森病、疼痛和抗抑郁藥物可能會使便秘惡化。便秘的準(zhǔn)確診斷和充分治療對于預(yù)防腸道阻塞等并發(fā)癥和確保對左旋多巴的最佳臨床反應(yīng)至關(guān)重要。流行病學(xué)根據(jù)用于定義慢性便秘的不同診斷標(biāo)準(zhǔn)、使用的量表類型和納入研究人群（早期或晚期、選擇或未選擇），PD中便秘的患病率范圍24.6%至63%?？紤]到最常用的頻率標(biāo)準(zhǔn)（即每周排便＜3次），發(fā)現(xiàn)PD中便秘的中位患病率為50%，范圍從20%到63%。排便頻率，也顯示出各種研究的差異(33%–83%)。在運動不能-僵硬型和震顫為主的表型患者中也發(fā)現(xiàn)了不同的患病率,在晚期帕金森病和新發(fā)帕金森病患者中患病率分別為64%比49%和45%比21%。大量研究最終表明，無論使用何種定義或評估量表，便秘患病率與疾病進展和H-Y分級階段呈正相關(guān)。治療1、飲食結(jié)構(gòu)的改變：飲食方面建議增加液體攝入量和基于高膳食纖維水平的飲食方案，富含不溶性纖維的飲食對便秘有顯著的改善作用，這可以從大便頻率的增加和大便稠度的改善中看出。例如1)蔬菜類：芹菜、韭菜、菠菜、白菜等；2)薯類：紅薯、紫薯、土豆等；3)谷類：燕麥、玉米、麥麩、蕎麥等；4)水果：香蕉、山楂、蘋果、紅心火龍果、元棗子等。2、建立正確排便習(xí)慣及姿勢：每天養(yǎng)成定時排便的習(xí)慣，，建議晨起或早餐后2小時內(nèi)嘗試排便；另外排便每次時間不超過5分鐘；排便時要集中注意力，減少外界因素干擾，更不要一邊排便，一邊看書、看報等。此外，建議患者采取適當(dāng)?shù)呐疟阕藙?見下圖)，在坐位時，由于恥骨直腸肌收縮，排便更加困難，這會阻塞直腸以保持大便節(jié)制，因此，為方便排便，建議采用蹲姿，在蹲姿下，恥骨直腸肌放松，排便更容易、更徹底。姿，在蹲姿下，恥骨直腸肌放松，排便更容易、更徹底。3、適當(dāng)運動和按摩：對病情較輕的患者，適當(dāng)?shù)捏w育鍛煉能改善胃腸蠕動，提高腹部和會陰部肌肉的肌力，有利于排便?？纱蛱珮O拳、做五禽戲等緩慢的有氧運動。對病情較重行動不便的患者，可做腹部按摩：一種是雙手自胸腔肋骨下緣從上往下按摩，在向下的過程中用一定的力量下壓腹部，每天反復(fù)多次；另一種是雙手交疊放在臍旁一寸，然后按順時針方向，由里向外做環(huán)行按摩，每天反復(fù)多次。4、情緒疏導(dǎo)：家人應(yīng)用熱情、尊重、真誠和積極的態(tài)度對待患者。一般輕度以下的焦慮和抑郁給予適當(dāng)?shù)男睦硎鑼?dǎo)即可改善，若是中度以上焦慮和抑郁則應(yīng)在醫(yī)生指導(dǎo)下口服抗抑郁和焦慮的藥物進行治療。5、藥物治療1）滲透性瀉藥：包括聚乙二醇（福松）、乳果糖。該藥物耐受性良好，且不影響PD運動癥狀，國內(nèi)、國際的治療指南推薦聚乙二醇用于帕金森病便秘的治療，聚乙二醇的效果優(yōu)于乳果糖，滲透性瀉藥應(yīng)慎用在腎功能和心臟功能不全以及老年患者中，因為他們?nèi)菀滓痣娊赓|(zhì)異常和容量超負(fù)荷。。2）刺激性瀉藥：現(xiàn)在市面上賣的瀉藥大多為刺激性瀉藥，包括果導(dǎo)片、蘆薈、大黃、番瀉葉、蓖麻油等。刺激性瀉藥不建議長期應(yīng)用，長期使用會出現(xiàn)結(jié)腸黑變病。3）潤滑性瀉藥：代表藥物為開塞露、液體石蠟，主要有軟化糞便的作用；特點是起效快，但不建議長期應(yīng)用，長期應(yīng)用會使直腸敏感性下降，導(dǎo)致排便更加困難。

帕金森患者飲食原則＆注意事項帕金森病人不僅有震顫、強直和運動遲緩等運動癥狀，而且常見便秘和胃腸功能減低，所以帕金森患者的飲食就顯得非常重要。帕金森的飲食原則：1、豐富好飲食，快樂好心情帕金森患者的飲食中食物應(yīng)多種多樣，包含谷類、蔬菜瓜果類、奶類或豆類、肉類等。多樣化食物能滿足身體對各種營養(yǎng)的需要，也使飲食本身富于樂趣。在輕松的環(huán)境和氣氛中愉快進餐，讓飲食作為一種生活享受。2、肉禽要分類，油腥不要沾肉類食物可以分配在早、晚或午、晚餐中，但是對于一些患者，為了使白天的藥效更佳，也可以嘗試一天中只在晚餐安排蛋白質(zhì)豐富食物。3、每天8杯水，保養(yǎng)有秘方水是最佳的飲品，攝入充足的水分對身體的新陳代謝有利。充足的水分能使身體排出較多的尿量，減少膀胱和尿道細(xì)菌感染的機會。充足的水分也能使糞便軟化、易排，防止便秘的發(fā)生。由于飲水不足和用藥上的原因，有的患者會出現(xiàn)口干、口渴、眼干的癥狀，可以嘗試每天比前一天多喝半杯水的方法，逐漸增加飲水量至每天6-8杯。帕金森的飲食注意事項：1、多吃谷類和蔬菜瓜果：通常每天吃300-500克的谷類食物，如米、面、雜糧等。每天大約吃蔬300克的蔬菜或瓜類，1-2只中等大小的水果。2、經(jīng)常適量吃奶類和豆類：奶類含豐富的鈣質(zhì)，每天在晚上睡前喝1杯牛奶或酸奶。多吃豆腐、豆腐干等豆制品以及蠶豆(尤其是蠶豆莢)。3、限量吃肉類：每天攝入大約50克的肉類，選擇精瘦的畜肉、禽肉或魚肉。1只雞蛋所含的蛋白質(zhì)相當(dāng)于25克精瘦肉類。為了使白天的藥效更佳，可以嘗試一天中只在晚餐安排蛋白質(zhì)豐富食物。4、服藥半小時后進餐：通常服用左旋多巴藥物半小時后才進餐，以便藥物能更好地吸收?？梢栽诜幍耐瑫r吃一些低蛋白質(zhì)的食物如餅干、水果或果汁等，喝姜汁也有緩解惡心、嘔吐的效果。另外有的患者服藥后會不自主運動癥狀加重，可以進餐時服藥，通過延緩藥物吸收減輕癥狀。5、飲食治療個體化：由于患者的病情、身體耐受以及用藥情況等方面各有不同，因此飲食治療需要個體化，并隨情況的改變作相應(yīng)的調(diào)整。如患者同時患有其它疾病，還要兼顧這些疾病的特殊飲食要求。了解了帕金森病的飲食原則及注意事項后，希望患者家屬能按照上面的方法對患者進行護理。如果家中患有帕金森的患者或是自己就患有的話，可以根據(jù)以上的注意事項來調(diào)整一下自己的飲食。

一、帕金森合病并精神病性癥狀首先減少或停止抗膽堿能藥物，如金剛烷胺、單胺氧化酶抑制劑；然后減少或停止多巴胺激動劑，然后減少左旋多巴；對于幻覺和妄想，推薦選用氯氮平（6.25mg或12.5mg，50mg內(nèi)）或喹硫平；一些方法，如減少睡前服用藥物的方法，也有可能減輕精神病性癥狀。二、帕金森病合并抑郁焦慮對于抑郁或焦慮，可應(yīng)用SSRIs類藥物（舍曲林和西酞普蘭有證據(jù)）。普拉克索也可改善帕金森患者的重度抑郁；注意患者是否同時在使用MAOI?！蹲叱鼋^望：心理醫(yī)生教你擺脫抑郁的折磨》

帕金森病患者出現(xiàn)便秘是常見的現(xiàn)象，便秘的表現(xiàn)為大便費勁，好幾天一次，經(jīng)常因為排便而在衛(wèi)生間呆很長的時間，便后仍有不凈感，但大便不一定干結(jié)。大約70-80%的帕金森病都會出現(xiàn)不同程度的便秘，是同年齡、同性別正常人的2-4倍。帕金森病人容易便秘，在疾病前期，前驅(qū)期，可能10-20年會出現(xiàn)比較嚴(yán)重的便秘，跟疾病本身有一定關(guān)系，見于以下幾種情況：1、帕金森病人行動遲緩，不僅是肢體行動遲緩，腸道蠕動也比較慢，導(dǎo)致便秘；2、Braak病理分期，在疾病發(fā)生前的10-20年，腸道異常蛋白聚集，也會出現(xiàn)便秘；3、帕金森病人吃藥也會使病人便秘，比如金剛烷胺、安坦，容易加重病人便秘；4、帕金森病人小便次數(shù)多，或者自己有顧慮，精細(xì)飲食，喝水少，粗纖維食物吃得比較少，或者運動也比較少，很少出門，在家躺著更會加重便秘癥狀。帕金森病合并的便秘常比較頑固，形成慢性便秘，嚴(yán)重影響帕友們的生活質(zhì)量。需要采取綜合措施改善便秘：1.改變飲食結(jié)構(gòu)增加膳食纖維和飲水量作為慢性便秘的基礎(chǔ)治療措施。膳食纖維的攝入推薦量為20-35g/d，并推薦使用可溶性膳食纖維，增加水果攝入量，每天攝入足夠的水也會增強膳食纖維的通便作用。益生菌是指能對宿主起有益健康作用的活微生物，常用于治療慢性便秘的益生菌主要是雙歧桿菌屬和乳酸桿菌屬。有的帕友因為害怕便秘而減少進食量，結(jié)果導(dǎo)致體重下降，便量減少，反而使便秘進一步加重，這是不可取的。2、適當(dāng)運動適當(dāng)增加運動量對日常運動較少或老年便秘患者療效好，簡單的運動方式為健步走，根據(jù)個人身體狀況規(guī)定每日行走步數(shù)，如體質(zhì)較差，可以循序漸進，可以小量多次運動。慢性便秘患者需建立良好的排便習(xí)慣。晨起的起立反射可促進結(jié)腸運動，有助于產(chǎn)生便意。建議便秘患者在晨起和餐后2小時內(nèi)嘗試排便。排便時間不要過長，容易導(dǎo)致體力過度消耗。3、藥物治療胃腸動力藥物可作為慢性便秘的治療選擇，對于輕、中度便秘患者可應(yīng)用容積性瀉劑和滲透性瀉劑。4、帕金森藥物調(diào)整及腦起搏器手術(shù)抗帕金森病藥物對于便秘可能有雙重影響，有研究發(fā)現(xiàn)多巴胺能藥物可能加重便秘；另一些研究則顯示左旋多巴可改善出口梗阻性便秘。抗膽堿能藥物可加重便秘，因此對于便秘的患者，應(yīng)慎用鹽酸苯海索或者低劑量服用。對于帕金森病癥狀較重，藥物治療蜜月期已過，可以考慮腦起搏器手術(shù)治療，術(shù)后能夠有效改善震顫、僵直，本身的帕金森癥狀改善了，便秘也會得到改善。

藥物抑制NLRP3可降低帕金森病模型中α-突觸核蛋白的水平并保護多巴胺能神經(jīng)元實驗?zāi)康脑u估OLT1177通過抑制NLRP3炎癥小體的齊聚和激活在帕金森病MPTP神經(jīng)毒性模型中減少炎癥反應(yīng)的有效性。????實驗原理PD的病理特征是黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元缺失，導(dǎo)致紋狀體神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺(DA)水平降低。而細(xì)胞內(nèi)α-突觸核蛋白的聚集被認(rèn)為是多巴胺能神經(jīng)元死亡的主要致病機制。除了α-突觸核蛋白在PD的發(fā)病機制中的作用外，神經(jīng)炎癥也可導(dǎo)致多巴胺能神經(jīng)元的變性。PD患者死后發(fā)現(xiàn)黑質(zhì)紋狀體多巴胺能區(qū)促炎細(xì)胞因子水平升高。死亡的多巴胺能神經(jīng)元的損傷相關(guān)分子模式(DAMPs)有助于PD患者黑質(zhì)致密部中小膠質(zhì)細(xì)胞的激活。活化的小膠質(zhì)細(xì)胞通過釋放促炎細(xì)胞因子和神經(jīng)毒性因子促進額外的損傷。因此，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)是緩解PD癥狀的一種有希望的方法。炎癥機制中最重要的是NLRP3。NLRP3是一種細(xì)胞內(nèi)大分子復(fù)合體，參與炎癥反應(yīng)的第一階段。NLRP3感知并被多種刺激激活，包括Toll樣受體、RNA病毒、細(xì)胞外ATP和細(xì)胞因子。NLRP3的激活會導(dǎo)致非活性caspase-1的寡聚化，并轉(zhuǎn)化為具有催化活性的caspase-1。激活的caspase-1啟動下游處理并釋放促炎細(xì)胞因子IL-1和IL-18。在PD中，最近的研究結(jié)果表明NLRP3炎癥小體的激活對多巴胺能神經(jīng)退行性變至關(guān)重要。OLT1177是一種小的合成化合物(MW133.17g/mol)，可以選擇性地抑制NLRP3炎癥小體的齊聚和激活。在本研究中，作者評估了OLT1177對1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)模型小鼠PD的治療作用。實驗方法1.MPTP造模MPTP采用兩種劑量方案(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO，USA)：急性和亞急性。對于急性方案，MPTP在一天內(nèi)給腹腔注射四次。每隔2小時給藥一次，持續(xù)6小時。對于亞急性方案，小鼠只接受一次。MPTP每日給藥，連續(xù)5天。兩種模型每次注射均使用20mg/kg游離基MPTP。使用無菌生理鹽水作為載體。對照組小鼠按相同的給藥程序注射生理鹽水，定義為假手術(shù)。在第一次注射MPTP后的不同時間處死小鼠。2.?OLT1177造模OLT1177在第一次MPTP注射前1小時給予腹腔注射。使用了兩種不同劑量的OLT1177:60mg/kg和200mg/kg。OLT1177每天給藥1次，直至實驗結(jié)束。每天都準(zhǔn)備新的溶液。以生理鹽水為載體。3．運動能力評估Rotarod試驗用于評估MPTP急性給藥小鼠的運動功能。作者使用了一個帶有3厘米圓柱桿的旋轉(zhuǎn)桿裝置和一個加速程序。小鼠在MPTP給藥前進行了連續(xù)三天的訓(xùn)練。在每個訓(xùn)練階段，小鼠被置于四種恒定速度(10轉(zhuǎn)、20轉(zhuǎn)、30轉(zhuǎn)和40轉(zhuǎn))下，持續(xù)150秒。在測試日，MPTP后3天，將小鼠以30轉(zhuǎn)/分的速度放置在旋轉(zhuǎn)支架上150秒。150秒后，加速階段開始，在500秒的間隔內(nèi)，速度從30轉(zhuǎn)增加到70轉(zhuǎn)。墜落的時間被記錄下來。加速訓(xùn)練重復(fù)3次，每次訓(xùn)練之間休息5分鐘。計算每只小鼠的平均跌倒時間，并用于最終測量。假手術(shù)+生理鹽水組9只。MPTP+生理鹽水組12只。MPTP+OLT1177組分別給予60mg/kg和200mg/kg劑量的小鼠9只和14只。4.?小膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng)將P3幼鼠的大腦分離和分解，以制備混合膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)。至少培養(yǎng)10天后，收集上層生長的小膠質(zhì)細(xì)胞，并以50000個細(xì)胞/孔的密度鍍在96孔板上。為了敲除ATG5，使用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑(Invitrogen,Waltham,MA,USA)按照制造商的協(xié)議將干擾ATG5基因的RNAs轉(zhuǎn)染到小膠質(zhì)細(xì)胞中。實驗在轉(zhuǎn)染后72h進行。5.?重組α-突觸核蛋白的制備將凍干后的標(biāo)本復(fù)水至1mg/ml濃度，37℃恒溫攪拌培養(yǎng)3天，誘導(dǎo)聚集。體外用10μM濃度的聚集體刺激小膠質(zhì)細(xì)胞。6h后，收集上清，洗滌2次，用RIPA緩沖液加蛋白酶抑制劑裂解細(xì)胞。體外用10μM濃度的聚集體刺激小膠質(zhì)細(xì)胞。6h后，收集上清，洗滌2次，用RIPA緩沖液(ThermoFisher,Waltham,MA,USA)加蛋白酶抑制劑(ThermoFisher)裂解細(xì)胞。培養(yǎng)標(biāo)本采用免疫印跡法分析。為了評估α-突觸核蛋白的清除，用10μM的α-突觸核蛋白刺激細(xì)胞1h脈沖，用新鮮培養(yǎng)基漂洗2次，在新鮮培養(yǎng)基中再孵育5小時。在所有病例中，細(xì)胞在α-突觸核蛋白刺激前用10μMOLT11771h處理。實驗重復(fù)3次。之后是WB的常規(guī)操作。6.腦勻漿中α-突觸核蛋白和TREM2的測定用免疫印跡法檢測α-突觸核蛋白，在亞急性給藥后24小時處死小鼠。切取腹側(cè)中腦(VM)，在RIPA緩沖液中加入蛋白酶抑制劑，用TIssueRuptor勻漿。根據(jù)制造商的說明，使用BCA蛋白質(zhì)分析試劑盒測定蛋白質(zhì)濃度。將樣品在相同的提取緩沖液中稀釋至2μg/μl，于給藥后第4天處死小鼠。切除紋狀體(St)，提取蛋白質(zhì)并進行定量。每個樣品30μg的蛋白質(zhì)在MiniProteanTGX4-20%梯度凝膠中溶解，并轉(zhuǎn)移到0.1μm硝酸纖維素膜。用小鼠α-突觸核蛋白一抗(1：1000，細(xì)胞信號)或TREM2(1：1000，細(xì)胞信號)孵育細(xì)胞膜過夜。每組4-5只小鼠。7.?腦勻漿中細(xì)胞因子的測定于MPTP急性給藥后第4天和第7天處死小鼠。收集腦組織，切除雙側(cè)大腦半球St區(qū)和Vm區(qū)，在液氮中冷凍。樣品在添加了蛋白酶抑制劑的RIPA緩沖液中用TIssueRuptor均質(zhì)。根據(jù)制造商的說明，使用BCA蛋白質(zhì)分析試劑盒測定蛋白質(zhì)濃度。樣品在相同的萃取緩沖液中稀釋至2μg/μl。腦勻漿中IL-1β、IL-18、IL-6和IL-17A水平用ELISADuoSet試劑盒檢測。在微型平板閱讀器中對吸光度進行定量。根據(jù)每個樣本的蛋白質(zhì)濃度對最終值進行歸一化。每組4-5只。8.?TH、Iba1、GFAP免疫染色MPTP急性給藥7天后，小鼠在PBS中灌流4%多聚甲醛(Sigma-Aldrich)。取腦在相同的灌流緩沖液中浸泡過夜，然后在4℃下用30%蔗糖在0.1MPBS中冷凍保護，脫水后，將標(biāo)本包埋在石蠟?zāi)＞咧星衅『蠸T和SNPC的腦冠狀切片(4-μm厚)并轉(zhuǎn)移到玻璃顯微鏡玻片上。為評估多巴胺能神經(jīng)元的活性，采用酪氨酸羥化酶(TH)免疫組織化學(xué)方法檢測黑質(zhì)紋狀體的完整性?？乖迯?fù)后，將玻片與一抗TH抗體在室溫下孵育30min。用抗兔HRP偶聯(lián)的二次聚合物檢測TH抗體的結(jié)合，然后用二氨基聯(lián)胺顯色。蘇木素逆染顯示細(xì)胞核。用NIHImageJ軟件測量紋狀體的積分密度，計算紋狀體多巴胺能免疫反應(yīng)性。對SNPC內(nèi)TH陽性神經(jīng)元進行體視學(xué)計數(shù)。每只小鼠三個切片。為評估小膠質(zhì)細(xì)胞增生癥和星形膠質(zhì)細(xì)胞增生癥，使用離子鈣結(jié)合適配器分子1(IBA1，1：15,000，Abcam)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP，1：200，Abcam)抗體。樣品的處理由InuvBoulder進行。每組6-7只。9.腦組織勻漿中OLT1177濃度及外周血分析MPTP急性給藥后第7天，采集外周血和腦組織標(biāo)本。用0.5M乙二胺四乙酸乙二酯(EDTA)管抽吸外周血。用血細(xì)胞計數(shù)器測量白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞。樣品在5,000rpm下離心10分鐘以分離血漿切片。從大腦中分離出VM。用串聯(lián)質(zhì)譜儀測定血漿和VM勻漿中的OLT1177含量。每組5只小鼠。10.統(tǒng)計分析正態(tài)分布檢驗采用Kolmogorov-Smirnov檢驗。大多數(shù)分析采用帶有Tukey后校正的單因素方差分析。使用Kaplan-Meier檢驗來評估轉(zhuǎn)桿裝置的速度模式的差異。外周血細(xì)胞數(shù)采用雙因素方差分析和Tukey的后校正。結(jié)果用均值±掃描電子顯微鏡表示，在p<0.05時被認(rèn)為是顯著的。實驗結(jié)果1.OLT1177挽救與MPTP相關(guān)的運動障礙作者測試了MPTP-急性給藥后OLT1177是否影響小鼠的運動性能。使用加速旋轉(zhuǎn)桿測試來評估小鼠的運動技能。三天后，MPTP治療降低了小鼠的運動能力，與未接受MPTP治療的小鼠相比，其運動能力下降時間顯著縮短(120秒)（圖a）。MPTP+生理鹽水組中約50%的小鼠在轉(zhuǎn)速提高到7cm/s前在旋轉(zhuǎn)筒上失敗;均未達(dá)到8cm/s。與MPTP+生理鹽水組相比，低劑量OLT1177(60mg/kg)治療的小鼠并沒有顯示出任何顯著的改善。高劑量OLT1177(200mg/kg)治療通過加倍(p<0.001)下降時間，挽救了與MPTP相關(guān)的運動障礙。與假手術(shù)組相似，200mg/kg劑量組大約50%的小鼠達(dá)到8cm/s，其中一只達(dá)到9cm/s（圖b）。2.OLT1177跨越血腦屏障達(dá)到治療濃度MPTP可減少外周血循環(huán)白細(xì)胞的數(shù)量，尤其是淋巴細(xì)胞。然而，在給藥OLT1177后，這些細(xì)胞的數(shù)量顯著增加。3.OLT1177提高α-突觸核蛋白的體外清除率OLT1177至少在一定程度上通過提高小膠質(zhì)細(xì)胞的自噬能力來增加α-突觸核蛋白在小膠質(zhì)細(xì)胞中的降解。4.OLT1177阻止α-突觸核蛋白在腦內(nèi)聚集作者評估了OLT1177對該蛋白水平的影響。在最后一次亞急性注射MPTP后24h處死小鼠，WB檢測α-突觸核蛋白水平。選擇VM作為評價α-突觸核蛋白積累的區(qū)域。MPTP誘導(dǎo)α-突觸核蛋白單體增加2.5倍(17kDa)，這與α-突觸核蛋白的各種低聚形式(150-30kDa)的高聚集有關(guān)，與體外數(shù)據(jù)一致，OLT1177顯著降低了α-突觸核蛋白的單體和寡聚物的水平，使其接近基礎(chǔ)水平。5.OLT1177降低大腦中促炎癥細(xì)胞因子的水平細(xì)胞因子動力學(xué)的數(shù)據(jù)表明，MPTP誘導(dǎo)了一種以激活NLRP3為特征的炎癥反應(yīng)，而OLT1177有效地降低了這些細(xì)胞因子的水平，將炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)到基線水平。6.OLT1177保護多巴胺能神經(jīng)元免受MPTP誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡在黑質(zhì)紋狀體通路中多巴胺能神經(jīng)元水平較低時，用TH免疫組織化學(xué)染色觀察OLT1177對黑質(zhì)紋狀體通路的影響。與假手術(shù)組相比，MPTP組的ST纖維水平降低了45%。SNPC中，陽性神經(jīng)元的數(shù)量從4000個減少到1000個。OLT1177治療可保護多巴胺能神經(jīng)元免受MPTP的有害影響。在ST區(qū)，與生理鹽水組相比，OLT1177組小鼠的TH陽性纖維密度增加(p<0.05)。經(jīng)OLT1177處理后，SNPC內(nèi)TH陽性神經(jīng)元的數(shù)量也增加了3倍。與上述α-突觸核蛋白的減少相關(guān)，這些結(jié)果表明OLT1177可以保護多巴胺能神經(jīng)元免受MPTP的毒性。7.OLT1177降低與MPTP相關(guān)的星形膠質(zhì)細(xì)胞增多癥和小膠質(zhì)細(xì)胞增多癥的反應(yīng)性在ST區(qū)，作者發(fā)現(xiàn)與生理鹽水處理的MPTP小鼠相比，OLT1177顯著減少了GFAP陽性細(xì)胞的數(shù)量和面積，還觀察到IBA1陽性細(xì)胞的數(shù)量減少，并有降低免疫反應(yīng)的趨勢。在SNPC中，OLT1177顯著降低GFAP的水平，并略微減少IBA1陽性細(xì)胞的數(shù)量和面積。這些數(shù)據(jù)顯示出OLT1177減少了MPTP相關(guān)的炎癥反應(yīng)。8．OLT1177維持紋狀體中TREM2的水平最近的研究結(jié)果表明，髓細(xì)胞觸發(fā)受體II(TREM2)是治療PD的潛在靶點，因此，作者測量了OLT1177治療后的TREM2水平。在MTPT急性給藥后第4天測定腦St區(qū)TREM2蛋白水平。MPTP暴露導(dǎo)致TREM2非糖基化形式(28kDa)水平降低25%，而OLT1177處理使這些水平正?；＝Y(jié)論作者的研究數(shù)據(jù)支持NLRP3在PD病理進展中的關(guān)鍵作用并且發(fā)現(xiàn)OLT1177在PD小鼠模型中是安全的，它穿過血腦屏障，有效地最小化了PD的特征，包括α-突觸核蛋白聚集物和促炎標(biāo)志物的減少。所有這些變化都轉(zhuǎn)化為多巴胺能神經(jīng)元的保護和運動能力的提高。這些結(jié)果為今后研究OLT1177抑制PD患者NLRP3提供了理論依據(jù)。

【綜述】GBA1基因變異與帕金森病研究進展摘要GBA1基因是帕金森病常見的風(fēng)險基因之一，編碼葡萄糖腦苷脂酶。盡管攜帶GBA1雜合變異的帕金森病（GBA1-PD）患者與原發(fā)性帕金森病患者在臨床上難以區(qū)分，但GBA1-PD傾向于進展更快，病情更重，更易合并認(rèn)知損害和其他非運動癥狀。GBA1雜合變異攜帶者增加患帕金森病風(fēng)險的病理機制可能與自噬-溶酶體功能紊亂、線粒體功能障礙等相關(guān)。針對GBA1的靶向治療有望成為帕金森病精準(zhǔn)治療的新方向。文中將對GBA1-PD的流行病學(xué)、臨床特征、GBA1變異可能的致病機制以及針對GBA1-PD的治療策略進行闡述。帕金森?。≒arkinson′sdisease）是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病，其病理改變主要是黑質(zhì)致密部多巴胺能神經(jīng)元壞死以及胞內(nèi)α-突觸核蛋白（α-synuclein，α-syn）異常沉積。盡管帕金森病的發(fā)病機制尚不清楚，但隨著第一個帕金森病致病基因SNCA（alpha-synuclein）的發(fā)現(xiàn)，遺傳因素在帕金森病發(fā)病機制中的作用越來越受到重視。目前LRRK2（leucine-richrepeatkinase2）和GBA1（glucocerebrosidase1）是散發(fā)性帕金森病中最常見的風(fēng)險基因，其中GBA1變異的發(fā)病風(fēng)險最高［?1?,?2?］。GBA1基因變異最初發(fā)現(xiàn)于常染色體隱性遺傳的戈謝?。℅aucherdisease），它是溶酶體貯積癥中最常見的一種。GBA1純合變異可導(dǎo)致其編碼的葡萄糖腦苷脂酶（glucocerebrosidase，GCase）活性顯著下降，使其底物葡萄糖神經(jīng)酰胺（glucosylceramide，GlcCer）在巨噬細(xì)胞中蓄積，從而引起戈謝病，有些患者可出現(xiàn)帕金森病樣的表現(xiàn)。GBA1雜合變異是帕金森病的重要風(fēng)險變異，其攜帶者在80歲前患帕金森病的概率約為10%~30%，約為非攜帶者的20倍，不同種族人群中約5%~25%的散發(fā)性帕金森病患者攜帶有GBA1雜合變異［?2?,?3?］。GBA1與帕金森病關(guān)系密切。文中將對伴有GBA1雜合變異的帕金森?。℅BA1-PD）的流行病學(xué)、臨床特征、GBA1變異可能的致病機制以及針對GBA1-PD的治療策略進行闡述。一、GBA1基因變異在帕金森病中的分布及致病風(fēng)險不同種族的散發(fā)性帕金森病患者攜帶GBA1變異的比例有所不同，一般是5%~10%，在德系猶太人中比例則可高達(dá)10%~30%。而在普通健康人群中攜帶GBA1變異的比例為1%，在德系猶太人中為5%［?3?］。一項針對中國帕金森病患者的薈萃分析結(jié)果顯示，帕金森病患者攜帶GBA1?N370S和L444P等幾個變異的頻率為3.64%，而在正常人群中僅為0.17%［?4?］。目前發(fā)現(xiàn)的GAB1變異有300余種，大多數(shù)是錯義變異，在帕金森病患者中發(fā)現(xiàn)的變異大約有130個［?5?］。已證明N370S、L444P、R120W、IVS2+1G>A、H255Q、D409H、E326K、T369M等與帕金森病發(fā)病風(fēng)險增加相關(guān)，以N370S和L444P最為常見［?6?］。不同變異在不同種族帕金森病患者中的分布有所不同，N370S變異在德系猶太人群中最為常見，占GBA1變異的71.89%，非德系猶太人群中則以L444P變異為主（33.33%）；在歐洲人群中N370S變異的比例（22.46%）略高于L444P（16.43%），而L444P變異在亞洲人群中更為普遍［?4?，?7?］，在中國GBA1-PD中有62.14%為L444P變異［?4?］。不同變異對不同種族患帕金森病的風(fēng)險的影響不同，N370S和L444P在除非洲人群外均顯著增加帕金森病發(fā)病風(fēng)險；N370S增加德系和非德系猶太人患帕金森病的風(fēng)險，而L444P僅影響非德系猶太人患帕金森病的風(fēng)險，且這一影響在亞洲人群中更為顯著，中國人群中攜帶L444P變異者患帕金森病的OR值為11.68［?4?］；另外，如84GG、R496H僅增加德系猶太人群患帕金森病的風(fēng)險，H255Q、D409H、E326K僅增加歐洲及西亞人群的風(fēng)險，而R120W與東亞人群相關(guān)［?6?］。GBA1變異根據(jù)其所引起戈謝病的臨床表型分為重度和輕度變異。伴神經(jīng)系統(tǒng)病變的變異通常被稱為重度變異，其中表現(xiàn)為急性神經(jīng)病變的稱為戈謝病-Ⅱ型，表現(xiàn)為慢性神經(jīng)病變的稱為戈謝病-Ⅲ型，該類變異包括IVS2+1、84GG、V394L、D409H、L444P等；輕度變異如N370S和R496H，一般不引起神經(jīng)系統(tǒng)損害，稱為戈謝病-Ⅰ型［?1?，?8?］；這些變異均屬于致病性變異。另外有些GBA1變異并不導(dǎo)致戈謝病，但可增加帕金森病的發(fā)病風(fēng)險，常見的有E326K、T369M、K7E和D443N?［?9?］，這類變異被稱為良性變異。攜帶重度變異者患帕金森病的風(fēng)險是攜帶輕度變異者的4倍［?10?］，而良性變異如E326K和T369M僅稍增加帕金森病的發(fā)病風(fēng)險。不同GBA1變異類型的殘余GCase活性存在差異，重度變異殘余活性為13%~24%，輕度變異為32%~38%，良性變異為54%~64%［?1?，?11?］，殘余酶活性的高低可影響GBA1的致病性。二、GBA1-PD的臨床特征盡管GBA1-PD在個體水平臨床表現(xiàn)與原發(fā)性帕金森病（idiopathicParkinson′sdisease，iPD）差異不大，但在群體水平GBA1-PD傾向于有以下幾個特點：（1）發(fā)病年齡相對較早［?12?,?13?］；（2）治療上所需的左旋多巴等效日劑量相對較高［?9?，?12?］；（3）運動癥狀更嚴(yán)重、進展更快［?9?，?12?,?13?,?14?,?15?］；（4）易出現(xiàn)運動并發(fā)癥［?13?］；（5）出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙、癡呆的風(fēng)險增加，認(rèn)知功能下降也較快，主要在工作記憶、執(zhí)行功能及視覺空間能力方面損害明顯［?9?，?12?,?13?，?15?］；（6）出現(xiàn)精神癥狀（妄想、幻覺、抑郁、焦慮等）、自主神經(jīng)功能障礙、沖動控制障礙的風(fēng)險增加、程度更重［?13?，?16?,?17?］；（7）死亡風(fēng)險增加，生存率下降［?9?，?12?］。在一些前瞻性研究中發(fā)現(xiàn)這種臨床差異在帕金森病早期并不明顯，而在病程超過7年時逐漸顯著，可能是在患病初期存在某種代償機制，當(dāng)超過其代償能力時疾病加速進展［?12?，?14?］。也有研究結(jié)果表明GBA1-PD與iPD在某些臨床表現(xiàn)如運動并發(fā)癥方面并無顯著差異［?16?］。這種研究結(jié)論上的差異考慮可能與帕金森病患者的種族、病程時期、所攜帶GBA1變異類型等有關(guān)。因GBA1變異在帕金森病人群中總體變異頻率并不高，所以目前的研究很少有針對某種變異的單獨研究，多是根據(jù)GBA1變異的致病性分為良性、輕度、重度變異進行研究。攜帶重度變異者相較于輕度變異和良性變異具有更高的帕金森病發(fā)病風(fēng)險，臨床表現(xiàn)也更為嚴(yán)重［?10?，?14?，?16?］。目前輕度變異和良性變異對帕金森病臨床表現(xiàn)的影響仍存在爭議，部分研究結(jié)果表明攜帶輕度變異或良性變異者相較于iPD具有更明顯的運動癥狀及認(rèn)知障礙［?9?，?14?］，也有研究結(jié)果表明輕度變異或良性變異在運動癥狀、除認(rèn)知功能以外的非運動癥狀及死亡風(fēng)險方面與iPD差異較?。?9?，?16?,?17?］。有研究發(fā)現(xiàn)良性變異E326K對認(rèn)知功能障礙的影響程度近乎甚至高于致病性GBA1變異［?18?］，其原因尚不清楚，由此可見不同變異可能在病理機制及臨床表現(xiàn)上存在差異，這種差異可能會影響臨床上治療策略的選擇。三、GBA1變異增加帕金森病風(fēng)險的相關(guān)機制（一）自噬和溶酶體功能紊亂GBA1純合或雜合變異的致病機制尚不完全清楚，可能是通過功能喪失或毒性功能獲得致病，目前較多的證據(jù)支持功能喪失的假說。在戈謝病患者的血液和GBA1-PD患者的血液、腦脊液中均發(fā)現(xiàn)有GCase活性下降，提示GBA1變異可導(dǎo)致GCase功能喪失。GCase在溶酶體中發(fā)揮作用，酶活性的下降可引起其代謝底物的異常堆積，影響自噬溶酶體通路，降低α-syn的處理能力。溶酶體在帕金森病發(fā)病機制中的作用越來越受到重視。近來的研究結(jié)果表明，大約56%的帕金森病患者存在至少一種溶酶體貯積癥致病基因的變異，約21%有兩個或以上，提示多個變異的聯(lián)合可能導(dǎo)致溶酶體功能的異常，增加帕金森病患病風(fēng)險［?19?］。溶酶體貯積癥致病基因變異在帕金森病患者中的廣泛存在，提示溶酶體功能可能是帕金森病發(fā)病機制中的關(guān)鍵因素。（二）線粒體功能障礙帕金森病的發(fā)病機制涉及線粒體功能障礙，如線粒體動力學(xué)異常、生物能缺陷、電子傳遞鏈功能受損和活性氧增加等。在動物模型及體外培養(yǎng)神經(jīng)元中，抑制GCase將導(dǎo)致線粒體功能失調(diào)，包括三磷酸腺苷合成受限、氧化應(yīng)激增加等，使受損線粒體增加，并增加α-syn水平［?20?］。GBA1變異也可能影響受損線粒體自噬，GCase活性下降阻礙溶酶體清除自噬體，變異的GCase抑制自噬誘導(dǎo)和受損線粒體凋亡。在GBA1-PD患者的腦組織中發(fā)現(xiàn)有線粒體自噬缺陷［?21?］。另外，線粒體穩(wěn)態(tài)受損可能與α-syn累積相互作用，α-syn累積可增加線粒體膜通透性和線粒體活性氧生成，進一步促進α-syn的錯誤折疊和累積［?22?］。（三）GCase與α-syn的相互作用GBA1變異導(dǎo)致GCase活性下降，通過影響自噬、溶酶體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)之間多種調(diào)控通路導(dǎo)致α-syn的累積。在GBA1-PD患者的血液、腦脊液、腦組織中檢測到GCase活性減低，并與α-syn累積相關(guān)。另一方面，α-syn的累積也會導(dǎo)致GCase活性減低。體外模型研究結(jié)果表明，在低pH值時α-syn會以α-螺旋形式選擇性地與GCase相互作用，并抑制GCase活性［?23?］。另外，在帕金森病狀態(tài)下過表達(dá)的α-syn還可能通過阻斷GCase從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到溶酶體的轉(zhuǎn)運，導(dǎo)致溶酶體中GCase活性降低［?24?］。在帕金森病患者的腦組織和培養(yǎng)的神經(jīng)元細(xì)胞中，發(fā)現(xiàn)α-syn水平升高將明顯抑制GCase活性，并且寡聚α-syn比單體作用更強［?25?］。GCase與α-syn之間的雙向作用所形成的惡性循環(huán)被認(rèn)為是影響帕金森病發(fā)病的關(guān)鍵因素，這種正反饋過程持續(xù)進行，直到超過致病閾值，導(dǎo)致神經(jīng)退行性變的發(fā)生［?24?］。四、GBA1-PD的治療策略目前針對戈謝病的藥物治療主要是酶替代療法和底物替代療法，以此來維持GCase的功能。這些療法已獲得美國食品藥品監(jiān)督管理局的批準(zhǔn)，可有效改善戈謝病患者內(nèi)臟癥狀，但由于無法通過血腦屏障，并不能改善戈謝病的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀［?26?］。目前對GBA1-PD的藥物治療與iPD無明顯差異，但考慮到GBA1-PD的臨床特點，如病情進展更快、更易出現(xiàn)認(rèn)知損害和其他非運動癥狀，在藥物選擇上應(yīng)更重視個體化治療，對于進展較快或合并認(rèn)知損害的患者可相對較早啟動左旋多巴治療。針對GBA1-PD的靶向治療藥物基本尚處于臨床前試驗階段，包括分子伴侶、自噬增強劑、GCase激活劑和葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶（glucosylceramidesynthase，GCS）拮抗劑等。分子伴侶包括氨溴索、阿瑞洛莫和NCGC607等；氨溴索作為一種神經(jīng)保護化合物，其可能通過影響轉(zhuǎn)錄因子、刺激溶酶體胞吐作用上調(diào)GCase的表達(dá)，并糾正GCase翻譯后的錯誤折疊，以此調(diào)節(jié)α-syn水平［?27?］；阿瑞洛莫是一種能有效地通過血腦屏障的具有細(xì)胞保護性作用的熱休克蛋白，可以增強戈謝病患者神經(jīng)元中GCase的折疊及活性［?28?］；NCGC607是GCase的小分子伴侶蛋白，可以恢復(fù)GCase的活性和含量，降低帕金森病患者多巴胺能神經(jīng)元中糖脂和α-syn水平［?29?］。自噬增強劑如雷帕霉素，通過改善自噬缺陷逆轉(zhuǎn)α-syn的蓄積，改善戈謝病動物模型的壽命及運動癥狀［?30?］。GCS拮抗劑可以降低GBA1-PD動物模型的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中糖脂和α-syn的水平，并改善認(rèn)知缺陷［?31?］。上述藥物通過不同機制影響GCase和α-syn水平，改善攜帶GBA1變異的患者或動物模型的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。這些研究有可能向臨床試驗推進，成為GBA1-PD治療的新策略。GBA1變異是散發(fā)性帕金森病最常見的風(fēng)險基因，且在α-syn與GCase的相互作用下，未攜帶GBA1變異的帕金森病患者的血液、腦脊液、腦組織中也檢測到GCase活性減低，推測GBA1靶向藥物對于散發(fā)性帕金森病也存在潛在治療作用。GCS拮抗劑可減少攜帶和未攜帶帕金森病變異的帕金森病動物模型中α-syn聚集，并改善其認(rèn)知缺陷［?31?］。氨溴索已進入探索性的臨床研究，通過口服氨溴索對8例GBA1-PD患者和10例iPD患者進行治療，結(jié)果顯示18例患者的腦脊液中氨溴索和GCase含量上升，國際運動障礙學(xué)會統(tǒng)一帕金森病評定量表第三部分的平均得分均下降，運動癥狀均得到改善［?27?］。由此針對GBA1的靶向治療有可能成為治療散發(fā)性帕金森病的新途徑。除藥物治療手段外，腦深部電刺激術(shù)（deepbrainstimulation，DBS）也是治療帕金森病的有效方法。關(guān)于GAB1-PD接受DBS治療的報道不多，但已有的研究結(jié)果表明DBS治療對于GAB1-PD的運動癥狀是有改善的，且與iPD相比療效無顯著差異，但術(shù)后抗帕金森病藥物劑量的減少不如iPD明顯［?32?］；GBA1-PD患者在術(shù)后更容易出現(xiàn)認(rèn)知障礙，且認(rèn)知損害程度更為嚴(yán)重，認(rèn)知以外的非運動癥狀表現(xiàn)也更嚴(yán)重，生活質(zhì)量明顯下降［?33?,?34?］。是否攜帶GBA1變異是DBS術(shù)后預(yù)測非運動癥狀進展的重要評估因素，基因篩查或應(yīng)成為術(shù)前決策的一部分，GBA1-PD是否采用DBS治療，應(yīng)評估患者術(shù)前的包含認(rèn)知功能在內(nèi)的非運動癥狀，并告知患者潛在風(fēng)險。五、結(jié)論GBA1變異是散發(fā)性帕金森病最常見的風(fēng)險基因，大約有5%~25%的帕金森病患者攜帶有此變異，以N370S和L444P最為常見，后者在亞洲人群中更為普遍。GBA1-PD相較于非攜帶者發(fā)病年齡更早、運動癥狀更重，更易出現(xiàn)認(rèn)知損害和精神癥狀。目前發(fā)現(xiàn)GBA1變異可以通過影響自噬、溶酶體、線粒體等之間的調(diào)控通路引起帕金森病相關(guān)病理改變。針對GBA1的靶向治療藥物正在從臨床前試驗階段逐步向臨床試驗推進，并有可能成為治療散發(fā)性帕金森病的新途徑。參考文獻(xiàn)略

帕金森病患者需長期用藥治療，但是長期用藥患者比較擔(dān)心的問題是并發(fā)癥的出現(xiàn)，帕金森病藥物一般從小劑量開始，規(guī)范用藥。有很多人對“維持量越低越好”產(chǎn)生誤解，不管病情如何，一律美多巴半片，一日三次，甚至有許多患者病情到了晚期仍然是低劑量的左旋多巴。其實這個“低劑量”并不是絕對值，而是相對的。如對美多巴而言，在早期可能每天一片半就能很好控制癥狀，用三片就沒必要?？墒堑搅酥型砥冢词故侨蓝喟涂赡芏疾还苡?，要用四片方可，這時每天的最小劑量就是四片，而用5片就沒必要。這就是所謂的“滴定”方法，一點一滴增加，增加到癥狀有明顯改善，卻又沒有明顯副作用的劑量時為止。總之，吃藥需要做到劑量盡可能小，長期規(guī)律地服用，能達(dá)到80%左右效果即可。帕金森藥物治療效果差，首先排查劑量是否足夠帕金森藥物的療效是與劑量相關(guān)的，如果服藥劑量沒有達(dá)到有效的“閾值”，導(dǎo)致體內(nèi)帕金森藥物的濃度沒有越過有效的“門檻”，可能造成雖然服藥但沒有療效的情況。而且對于同一類藥物，不同患者可能有不同的療效反應(yīng)。例如大多數(shù)患者服用美多巴有效，但一部分服用美多巴無效的患者改服用息寧后有效。有的患者服用森福羅無效，改用泰舒達(dá)有效，雖然這兩種藥物都屬于多巴胺受體激動劑。