大多數(shù)孤獨癥兒童都有刻板行為如果這種行為被打斷時會引發(fā)孤獨癥兒童強烈的情感沖突情況嚴重的還會推搡父母發(fā)泄不滿有的兒童甚至會通過拿自己腦袋撞墻、咬自己等行為來表示自己的沮喪什么是刻板行為？刻板行為指的是：無明顯目的的、不變的，以固定頻率反復重復而無任何功能效果的簡單行為。它大概可以分為以下六個大類：刻板行為明顯且毫無目的的運動或以一種相似的方式不斷重復的動作，例如：拍手、晃動身體、揮動手臂、手部和手指的動作等。強迫行為依據(jù)某種規(guī)則或以往做事的方式重復或實施的行為，例如：以一種特定的順序排列某些物品、門窗必須始終保持開著或關著、不斷檢查門窗、抽屜、數(shù)數(shù)等。自傷行為以一種相同的方式重復某些有可能造成身體傷害的行為動作，例如：撞擊頭部、拍打頭部、咬自己的手臂或手以及其他對身體造成傷害的行為。儀式化行為以相同的方式重復日常生活中的一些活動，自閉癥譜系障礙的儀式化行為更多地是和日常生活、自我照料有關，例如：衣食住行以及如廁的習慣、堅持食用某種固定的食物、睡前堅持做某種固定的事情以及堅持穿固定款式材料的衣服等。同一性行為拒絕變化，堅持事情保持不變的行為，例如：堅持要求某些物品處于相同的位置、被別人打斷活動會感到不安、堅持坐在相同的位置、堅持某些特定的事情在特定的時間發(fā)生等。狹窄興趣關注點、興趣點以及活動范圍狹窄或受限制，全神貫注于某項活動，強烈地依戀某種物品、迷戀能動的物品，比如鐘表的指針或風扇燈。喜歡物品的局部而非整體，比如喜歡玩弄玩具車的車輪，而不是喜歡玩具車。

臨床前研究-動物實驗，研究表明：胚胎期七氟烷暴露可致mPFC中興奮性和抑制性神經(jīng)元發(fā)育失衡，促進了GABA能神經(jīng)元發(fā)育。臨床前研究-細胞實驗研究表明：低濃度七氟烷促進人和小鼠胚胎神經(jīng)干細胞的增值，分化和生長；低濃度七氟烷促進人和小鼠胚胎神經(jīng)干細胞向中間能神經(jīng)元分化臨床研究：低濃度七氟烷輔助治療精神疾病急性期患者的效果：單臂，開放實驗，研究表明：低濃度七氟烷輔助治療減輕神經(jīng)分裂癥的癥狀。（來自廣州宋興榮教授資料）

胚胎期3%七氟烷3小時暴露致mPFC中興奮性和抑制性神經(jīng)元發(fā)音失衡，促進了GABA能神經(jīng)元的發(fā)育。1.8%七氟烷能改善創(chuàng)傷性腦損傷導致的神經(jīng)元凋亡，通過PI3K/AKT信號通路。2.5%七氟烷30min能改善新生大鼠缺氧缺血性損傷后的神經(jīng)元遷移障礙，并改善長期認知功能；1.8%七氟烷6小時能促進海馬區(qū)神經(jīng)發(fā)生和DG區(qū)依賴的學習能力。海馬體中GABAA受體α1具有和氯胺酮一樣的抗抑郁作用。（來自廣州宋興榮教授資料）

孤獨癥譜系障礙（自閉癥）目前以教育康復為主，藥物治療不是首選。但在患兒存在較嚴重的情緒不穩(wěn)、自傷、攻擊和破壞性行為，而行為矯正方法無效或者不可獲得的情況下，或共患其他精神障礙時，可以采用藥物治療。讓自閉癥患兒走向康復是世界性難題，目前沒有特效的藥物。但是有麻醉科醫(yī)生一直在探索患者康復的方法。近期來自麻醉治療學高峰論壇的消息：有專家報告了以自閉癥病人臨床研究的探索，從2022年5月6號開始共有27個自閉癥病人進行了低濃度七氟烷治療，有1個病人最多治療52次。所有病人的自閉癥三大核心癥狀改善，而目前未見副作用。初步結論：七氟烷可以反復多次使用，無成癮性。

在一般的社會生活中，正常發(fā)育的孩子，會在一歲半之前開始說出“爸爸、媽媽”，以及其他一些單詞單句的簡單話語。從兩歲半開始，正常發(fā)育的孩子就逐漸開始學會組織語言，并且能夠用語言去表達自己的意圖，自此以后，孩子的語言表達能力不斷地增強和完善。但是大家也許并沒有注意到，在日常中，還有一些孩子，他們3，4歲了，卻依然無法開口說話。他們從不和常人進行交流，也絕不會和他人發(fā)生目光對視，他們大多數(shù)情況下都表現(xiàn)的非常安靜，但又會冷不丁的發(fā)出奇怪的聲響。只要在日常生活中認真觀察就會發(fā)現(xiàn)，這樣的孩子，在我們身邊越來越多，他們是來自星星的孩子—自閉癥兒童。??自閉癥兒童的語言障礙特征歸納為三種類型：完全無語言、有部分語言，及有語言但無交際意圖。完全無言語類兒童雖然發(fā)音器官沒有受到太大損傷，可以正常叫喊、哭泣，發(fā)出怪聲，但是他們并不會說話，連簡單的單詞都不會，而且具有非常明顯的怪異動作，他們不由自主的搖晃身體，且與他人無目光接觸，會對某一種單一形式非常迷戀。由于他們無法理解他人話語、無法去表達自己的需要，因此他們往往用哭喊或手勢或僵硬的肢體動作等，來表達自己的需求。當?shù)貌坏酱笕说恼_理解時，他們會哭鬧、尖叫等表現(xiàn)出極端情緒，甚至出現(xiàn)危險刻板的自傷行為。有的不會說話但能聽懂口語，有的能聽懂一些語言指令但無法用語言表達自己的訴求，因此家長和老師更要注重溝通途徑和溝通方式，從而讓溝通能達到目的。?完全無言語類自閉癥兒童又分為終生默默不語和語言退化兩類。默默不語類兒童通常沉默不語地孩子活在自己的世界里，他的世界里只有他是唯一的，毫不注意周圍的環(huán)境。他們有時會在自我刺激下，莫名其妙的發(fā)出怪聲尖叫。他們的情緒會突然變得異常興奮，也會自然地露出非?？蓯鄣纳瞪档男θ荨Ｑ哉Z退化類兒童言語退化的自閉癥患兒，通常會在一歲半或者兩三歲的時候，出現(xiàn)過簡單的語言語聲或者一直重復一個單音，如“爸爸、媽媽、奶奶、水、抱抱”等，但長大后不知不覺中慢慢地消失。這會導致有的孩子有過言語發(fā)展，但發(fā)育到3歲以后卻部分或者完全喪失了已有的言語，言語缺乏會導致嚴重的認知功能受損，而認知功能的受損反過來又會嚴重影響患兒的非言語性交流，使得患兒缺乏想象力與創(chuàng)造力，嚴重者言語發(fā)育完全受阻，無言語理解能力。?有部分語言類在自閉癥兒童人群中占比例最高、也是最為常見的語言障礙癥狀人群，大多數(shù)自閉癥兒童都存在接受性言語障礙或是表達性言語障礙，甚至有一半的患兒就從未學會過日常交際所需要的語言。由于腦部存在質的損壞，所以在詞匯掌握上，自閉癥兒童積累新詞的能力會受到很大的限制。有部分語言類自閉癥兒童已經(jīng)掌握了一定的詞匯，但是由于其思維模式是固定的，所以進行詞匯的遷移會很困難。例如，他們學會了花園里的玫瑰花叫花，但他們往往弄不明白客廳花瓶里的玫瑰花或者花園里的喇叭花也都叫花。?有語言但無交際意圖類這一類自閉癥患兒存在語言，甚至有的孩子語言能力非常發(fā)達，但遺憾的是，他們的語言并非以與人交際為目的，他們說出的話并不是為了和他人進行正常交流，有的會一直自言自語不知所云，也有的患兒在交流中只會機械性的說出自己想要說出的話，而完全不顧說話的情景與表達意圖。這一類患兒他們運用語言的過程更像是在尋找自己說話的快樂，或者僅僅是為了滿足自己說話的需求，而毫無說話的目的和意圖可言。?這一類自閉癥患兒也可以進一步劃分為自言自語類、機械言語類以及自閉癥天才類三個類別。自言自語類的患兒通常和他人毫無交流，這類孩子往往說話能力非常發(fā)達，甚至是經(jīng)常性的喋喋不休。但他們的語言能力只是用來自言自語，而根本上不會用來和他人進行語言交流。有部分患兒明白他們自言自語的話語的含義，并且能夠在特定情境下，適應當時情景的自言自語。但是大部分患兒對自己說出的話語完全不知所云。機械言語類這一類自閉癥患兒可以回答他人的問題，與他人進行交流等，但奇怪的是他們的回答往往是答非所問，他們只是根據(jù)提問者的特定問題，完全機械性的背熟自己聽過的廣告語、背熟天氣預報等。他們的語言是一種自我中心語言，這一類兒童在與他人進行“交流”的過程中，他根本上不會關心當時的語境，他只會說出自己曾經(jīng)看過背熟的套話，不在乎對方能否聽懂。比如問：“你想去動物園嗎?孩子會回答：“跑得最快的是獵豹......”自閉癥天才類這一類患兒一般都是高功能自閉癥人群，他們兩三歲的時候，就會擁有遠超常人的記憶能力，會背詩歌，能識字念書，也有的孩子會表現(xiàn)出異乎尋常的計算能力，被稱為“天才”。但隨著孩子逐步長大，家長卻發(fā)現(xiàn)家里曾經(jīng)的“天才寶貝”有著明顯的社交障礙，他們的語言也往往無法用于與人進行交流，他們的語言更多的是用于自己所擅長的那個領域，固執(zhí)的堅持自己探尋的一個問題，以自我為中心的運用語言。直到現(xiàn)在，自閉癥孩子仍然有謎題未解開，有人稱他們?yōu)椤皝碜孕切呛⒆印?，有人稱之為“孤獨世界”，正因為沒人能夠進入、讀懂他們的世界，所以自閉癥的治愈更是難題，應該說到目前為止還沒有自閉癥完全康復的案例，但是經(jīng)過治療和干預，大多數(shù)自閉癥兒童都可以回歸正常生活。

首先，兒童有溝通能力的障礙。其次，兒童可能存在社交上的障礙。最后，兒童會有刻板重復的行為。先說溝通能力障礙。很多自閉癥的孩子缺乏甚至喪失口語發(fā)音的能力，還有一些可以正常發(fā)出聲音，但是沒辦法組織起完整的句子。由于沒有辦法表達自己的情緒，因此很多自閉癥患者都缺乏社交的能力。自閉癥患者也會有一些刻板重復的行為。很多患者的行為方式也會很刻板，比如，經(jīng)常用同一種方式做事或者玩玩具，要求物品放在固定的位置，出門非要走同一條線路，長時間內(nèi)只吃同一種食物等不過要注意，盡管大多數(shù)自閉癥患者有以上3點特征，但還是有少數(shù)患者這些特征表現(xiàn)不明顯，而有這三點特征，也不意味著就一定是自閉癥。???4、孩子5歲半，自閉癥干預一年半。別的不說，告訴你幾點只有自閉癥家長知道的事：1、自閉癥是一種和遺傳有關的病，千萬不要去指責孩子的帶養(yǎng)人！2、自閉癥無法根治，但可以近量接近普通人，有很大一部分自閉癥兒童長大后可以正常生活，不要怕。3、自閉癥是一種社交障礙。孩子是從他人身上獲得知識的，自閉癥孩子逃避對人的關注，所以無法學習到足夠的知識，不干預的話長久之后表現(xiàn)為能力低下，但其實他的智力和普通孩子并沒有差別。所以盡早干預，不要猶豫。4、要盡快接受現(xiàn)實，家庭內(nèi)部統(tǒng)一意見，減少無謂的爭執(zhí)和相互指責。帶孩子要全家出動，不要把孩子丟給某一個人，一個人是帶不了自閉癥娃的。5、不要怕丟臉，孩子的問題該說就說，大多數(shù)人都是有同情心的。像我就跟單位里說過孩子的問題，請假帶孩子干預的阻力就小很多。最后，自閉癥只是一種病，孩子病了，他還是我們的孩子，他可能表達不了，但他依然愛著父母家人，期待父母的關愛。請一如既往無條件地愛他。

【綜述】間充質干細胞及其外泌體治療孤獨癥譜系障礙的研究進展摘要孤獨癥譜系障礙（autismspectrumdisorder，ASD）是一類嚴重的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病，其病理生理機制尚不明確。目前，針對ASD的治療方式仍以藥物對癥治療和康復訓練為主，迫切需要更有效的治療方法。近年來研究者對ASD的干細胞療法，特別是間充質干細胞（mesenchymalstemcells，MSCs）的研究越來越多，而MSCs的治療效果可能是通過其分泌的外泌體發(fā)揮著重要的作用。本文將對MSCs及其外泌體治療ASD的研究進展進行綜述。孤獨癥譜系障礙（autismspectrumdisorder，ASD）是以社會交往與溝通能力下降、語言發(fā)育遲緩、興趣狹窄、行為和動作刻板為核心癥狀的神經(jīng)發(fā)育障礙性疾病，是導致兒童殘障最主要的疾病之一［1］。美國1項ASD網(wǎng)絡檢測計劃顯示近年來ASD的患病率呈明顯上升趨勢［2］。目前，ASD的病理生理機制尚不明確，越來越多的研究表明免疫相關因素起到了至關重要的作用［3］。而間充質干細胞（mesenchymalstemcells，MSCs）是一種可高度自我增殖和具有多向分化潛能的多能干細胞［4］，其自身還具有免疫調節(jié)的作用，可作為一種潛在的ASD的生物治療手段。MSCs的治療效果主要是通過其分泌的外泌體發(fā)揮重要的作用，相較于MSCs，無細胞治療的外泌體具有更大的優(yōu)勢。因此，本文就MSCs及其外泌體（mesenchymalstemcellexosomes，MSC-Exos）治療ASD的可能機制及其相關研究進展進行綜述。一、ASD的概述ASD的患病率近十余年來有顯著的上升，這可能與對ASD認識的提高和診斷標準的擴大有關。1項納入了74項研究的薈萃分析顯示，ASD的全球患病率約為6‰［5］。美國疾病預防控制中心2018年的調查數(shù)據(jù)顯示，全美11個不同地區(qū)8歲兒童中ASD的患病率平均為23‰［2］。國內(nèi)尚沒有大規(guī)模的流行病學調查數(shù)據(jù)，1項納入44項研究的薈萃分析顯示，我國ASD的患病率約為3.9‰［6］。目前，臨床上對ASD的治療主要是對癥治療，使用藥物緩解ASD患者焦慮、抑郁、注意缺陷與多動障礙等共病問題，但針對ASD的核心癥狀尚無有效的藥物。此外，康復訓練可以一定程度上緩解患者的核心癥狀，但需要耗費較大的人力及物力，給家庭和社會帶來了巨大的負擔［7］。因此，迫切需要針對ASD更有效的治療方法。近年來，越來越多的研究顯示免疫相關因素在ASD的發(fā)病機制中發(fā)揮著重要的作用，這為ASD的生物治療提供了新的方向。二、MSCs的生物學特性隨著細胞生物技術的進步，細胞療法和基于細胞的生物制藥成為一些尚無法治愈的疾病的一種潛在的治療方法，其中干細胞在再生醫(yī)學領域受到了較多的關注。MSCs是一類多能干細胞，來源于發(fā)育早期的中胚層，具有高度的自我更新能力和多向分化潛能，其在體內(nèi)或體外特定的誘導條件下，可以分化為心肌細胞、內(nèi)皮細胞等多種組織細胞［8］。MSCs在培養(yǎng)中相對容易擴增和分離，并且能夠自我更新和分化，這使其成為治療各種臨床病癥的一種潛在選擇。此外，MSCs還可以分泌具有免疫調節(jié)、抗凋亡、抗炎、促血管生成、促有絲分裂和抗菌等相關分子，包括免疫抑制分子、生長因子、外泌體、趨化因子、補體成分和各種代謝物等，這些分子有助于免疫調節(jié)和具有營養(yǎng)作用［9］。三、MSCs治療ASD的生物學機制目前較多的研究者提出，異常的免疫系統(tǒng)調節(jié)參與了ASD病理生理反應，ASD患者外周和中樞免疫系統(tǒng)存在持續(xù)的功能失調［10］，進而可導致相關的炎癥反應。異常的免疫炎癥反應與ASD患者的癥狀嚴重程度存在一定的相關。1.ASD的免疫炎癥反應：在外周免疫炎癥反應方面，多數(shù)學者認為ASD患者存在免疫細胞異常，有研究顯示，與對照者相比，ASD患者外周血中自然殺傷細胞活化增加，活化B細胞和活化T細胞增多，ASD患者體內(nèi)CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞失衡，同時還有單核細胞衍生的巨噬細胞出現(xiàn)功能失調［11］。異常的免疫細胞可以分泌細胞因子，細胞因子刺激、調節(jié)免疫系統(tǒng)活性，并誘導自身及其他細胞因子的合成。Siniscalco等［12］研究發(fā)現(xiàn)ASD患者外周血單核細胞中caspase-1基因表達增加，促進了促炎細胞因子IL-1β和IL-18的活化，從而導致體內(nèi)炎癥反應持續(xù)存在，除促炎細胞因子表達增加外，與對照者相比ASD患者外周血中抗炎細胞因子IL-4、IL-10、轉化生長因子-β1（transforminggrowthfactor-β1，TGF-β1）分泌減少。ASD患者的外周血異常免疫炎癥反應表現(xiàn)為免疫細胞功能的失調以及促炎細胞因子分泌增加和抗炎細胞因子分泌減少。在中樞免疫炎癥反應方面，目前針對ASD患者體內(nèi)小膠質細胞的研究已經(jīng)成為ASD免疫標志研究的一個新方向。ASD患者大腦內(nèi)往往伴隨著神經(jīng)元的損傷以及突觸功能的失調和可塑性破壞，神經(jīng)元損傷后作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)巨噬細胞的小膠質細胞會增生，并分泌促炎因子，而促炎因子具有直接的神經(jīng)毒性作用。小膠質細胞過度激活會損害周圍的健康神經(jīng)組織，并誘導受損的神經(jīng)元釋放警報素和損傷相關的分子模式（damageassociatedmolecularpatterns，DAMPs），這些因子又會激活小膠質細胞，從而形成惡性循環(huán)，大腦中激活的小膠質細胞會導致ASD樣的行為［13］。有研究顯示ASD患者腦脊液的促炎因子顯著增加，尸檢結果顯示，與健康對照者相比，ASD患者腦組織中促炎性細胞因子腫瘤壞死因子-α（tumornecrosisfactor，TNF-α）、IL-6、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子、干擾素-γ（Interferonγ，IFN-γ）、IL-8顯著增加［14］。并且在這些大腦區(qū)域和腦脊液中其他免疫反應相關的基因表達增多，提示ASD患者的腦中促炎途徑被激活。2.MSCs治療ASD的可能機制：在外周免疫方面，已有大量的研究報道了MSCs對免疫功能調節(jié)的作用。有研究表明，MSCs可以調節(jié)外周免疫細胞的活性，如促進調節(jié)性T細胞的產(chǎn)生，減少B細胞的活化和增殖，抑制自然殺傷細胞的增殖和細胞毒性以及抑制樹突狀細胞的成熟，此外MSCs可以抑制體內(nèi)外免疫細胞促炎因子的產(chǎn)生和促進抗炎因子的釋放［15］。MSCs可以通過抑制TNF-α和INF-γ等促炎因子的產(chǎn)生來抑制相關免疫細胞的增殖和擴增，增加IL-10水平促進調節(jié)性T細胞的產(chǎn)生［16］。綜上所述，ASD患者存在免疫細胞的失調以及促炎細胞因子分泌增加和抗炎細胞因子分泌減少，MSCs的免疫調節(jié)作用有可能恢復這種免疫失衡。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)方面，MSCs對神經(jīng)系統(tǒng)的作用機制尚不完全清楚，可能有以下2種機制：MSCs具有免疫調節(jié)作用，能夠穿越血腦屏障并遷移到組織損傷和炎癥部位，MSCs到達受損組織細胞后可以合成并釋放較多生物活性分子，如抗炎細胞因子、營養(yǎng)和生長因子、白細胞介素、巨噬細胞集落刺激因子以及干細胞因子等，這些因子可以參與受損組織的免疫調節(jié)，拮抗局部的炎癥反應，同時激活受損組織的內(nèi)源性修復機制［17］；MSCs具有神經(jīng)保護、神經(jīng)發(fā)生和突觸發(fā)生的作用，可以分泌促進神經(jīng)存活和發(fā)生的生長因子，如腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子、神經(jīng)生長因子等維持突觸的可塑性，進而促進局部再神經(jīng)化恢復突觸遞質釋放，并重建神經(jīng)系統(tǒng)功能的傳入和傳出［18］。四、MSCs治療ASD的基礎和臨床研究大量研究表明，MSCs在多個醫(yī)學學科領域發(fā)揮重要的作用，已有基礎和臨床研究顯示MSCs在治療ASD方面具有一定潛力。在動物實驗研究方面，目前廣泛接受的BTBR近交系ASD小鼠模型表現(xiàn)出類似ASD的行為和神經(jīng)解剖學異常，包括胼胝體缺失和海馬連合減少［19］，此外，還表現(xiàn)出腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子信號傳導的減少［20］。Segal-Gavish等［21］通過將人MSCs移植入BTBR小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，小鼠刻板行為減少、認知和社會行為改善，且與假手術處理的小鼠相比，組織分析顯示MSCs移植小鼠的海馬腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子蛋白水平升高，同時海馬神經(jīng)發(fā)生增加。進一步研究顯示，將MSC-NTF（體外誘導定向分化為能分泌更多神經(jīng)營養(yǎng)因子的MSCs細胞）移植入BTBR小鼠模型中顯示出更為長久的療效［22］。除BTBR小鼠模型外，還有丙戊酸（valproicacid，VPA）誘導的ASD小鼠模型，Ha等［23］研究了人類脂肪干細胞（humanadiposestemcells，hASCs），其為一種從脂肪組織中分離的自體MSCs，對丙戊酸誘導的ASD小鼠模型的治療作用，結果顯示hASCs移植可以改善VPA誘導的ASD小鼠的核心癥狀，如社交互動減少、焦慮情緒以及重復行為等。在臨床研究方面，研究者探索了人臍帶血單個核細胞和臍帶血MSCs聯(lián)合移植對治療ASD的安全性和有效性，結果顯示與單純的康復訓練組的患兒相比，MSCs移植組患兒具有一定的療效，而聯(lián)合移植組比單純的MSCs移植組具有更好的療效。在安全性方面，通過靜脈和鞘內(nèi)輸注的干細胞耐受性良好，在24周的隨訪期間沒有發(fā)現(xiàn)明顯的副作用［24］。Sharma等［25］對32例兒童和成人ASD患者進行含有MSCs自體骨髓單個核細胞的鞘內(nèi)注射，在之后26個月的隨訪中大多數(shù)患者在社會關系、情緒反應、溝通和行為等方面都得到了臨床改善。這些研究結果表明MSCs在治療ASD方面有一定的潛力和優(yōu)勢，但目前尚無統(tǒng)一的操作方法，如具體的干細胞選擇、移植方式等，而且長期應用的療效和安全性尚未明確，因此，仍需更多進一步的臨床研究證實。五、MSCs-Exos的無細胞生物療法盡管大量的文獻報道MSCs治療方法較為安全，但使用大劑量的MSCs時仍可能出現(xiàn)一些不良反應。比如微血管閉塞、移植細胞轉化為不適當?shù)募毎愋?、發(fā)生腫瘤和心律失常等副作用，且在出現(xiàn)不良反應時無法移除移植細胞［26］。近些年，有研究顯示MSCs的免疫調節(jié)和神經(jīng)保護等作用依賴于其細胞來源的生物活性因子，如脂質、蛋白質（酶、細胞因子、趨化因子、免疫調節(jié)蛋白、營養(yǎng)因子和生長因子）、微小RNA（microRNAs，miRNAs），這些生物活性因子可以有效調節(jié)免疫反應，誘導新血管生成，促進受損神經(jīng)元的修復和再生［27］。而這些生物活性因子被包含在MSC-Exos中。MSC-Exos是MSCs分泌的細胞外囊泡，相較于活細胞治療的MSCs，只有納米大小的非細胞MSC-Exos體積小易儲存，更容易穿透組織到達靶細胞，并且不會阻塞微血管系統(tǒng)，不會轉變?yōu)椴缓线m的細胞類型，也不會在停止治療后作為永久性移植物持續(xù)存在，可大規(guī)模生產(chǎn)應用于臨床治療［28］。既往已有相關研究表明，外泌體可能作為早期精神障礙診斷的生物標志物，并且外泌體miRNA可能成為未來精神障礙治療發(fā)展的藥物靶點［29］，這些都提示MSC-Exos可能成為ASD的一種潛在生物治療手段。關于MSCs-Exos治療ASD的病理生理機制尚未完全闡明，作為MSCs衍生的外泌體，MSCs-Exos除了具有MSCs所具有的免疫調節(jié)及神經(jīng)保護作用外，還可能通過以下機制實現(xiàn)對ASD的治療：首先，從細胞分子學角度MSCs-Exos可能通過調節(jié)ASD患者外周循環(huán)失調的巨噬細胞極化為抗炎M2樣狀態(tài)，使M2型巨噬細胞能夠調節(jié)炎癥因子達到外周抗炎作用［30］。此外，MSC-Exos可以表達CD29、CD44和CD73等幾種黏附分子，它們能夠促使MSC-Exos遷移到發(fā)炎和受傷的組織，通過與質膜融合將其內(nèi)容物遞送至靶細胞的胞質，從而調節(jié)受損組織的表型和功能［31］。其次，從蛋白質組學角度，MSCs-Exos中存在血管內(nèi)皮生長因子C、血管生成素-2和成纖維細胞生長因子-2，這些因子能夠促進新血管生成，進而可能調節(jié)ASD患者紊亂的大腦微環(huán)境［32］。最后，從基因組學角度，微陣列和質譜數(shù)據(jù)分析鑒定了MSC-Exos中4850個基因產(chǎn)物和4150個miRNA，其中miR-146和miR-21可能會改變神經(jīng)和免疫細胞的表型、功能和活性，miR-143與MSC-Exos的免疫調節(jié)作用有關，miR-10b與MSC-Exos的遷移能力有關，此外，MSC-Exos中高度表達的多種miRNA能夠調節(jié)細胞周期進程和增殖（miR-191、miR-222、miR-21）并調節(jié)血管生成（miR-222、miR-21）［33］，因此MSC-Exos在治療免疫性疾病及神經(jīng)炎性疾病中有至關重要的作用。已有相關研究將MSC-Exos應用于自身免疫性疾病以及神經(jīng)認知障礙性疾病的治療中［33,?34］。而關于MSC-Exos治療ASD只有少數(shù)的報道，且大多數(shù)仍停留在動物實驗階段。Perets等［35］的研究表明通過鼻內(nèi)給藥，采用MSC-Exos治療的BTBR小鼠在社交互動領域、社交溝通領域和重復行為方面表現(xiàn)出顯著改善。同時，為了研究MSC-Exos給藥是否對具有特定突變的轉基因ASD模型也有效，研究者還選擇Shank3B基因敲除的小鼠作為研究對象，結果顯示同樣可以改善ASD模型小鼠的核心ASD樣行為［36］?？傊?，相較于MSCs，無細胞治療的MSC-Exos具有更大的優(yōu)勢，但尚缺乏可靠的臨床前及臨床試驗，其中的機制也尚未完全闡明，這可能是今后研究干細胞治療ASD的方向。六、小結與展望綜上，目前關于ASD的發(fā)病機制尚不明確，越來越多的研究表明免疫相關因素在ASD的發(fā)病機制中起到了至關重要的作用。MSCs因其具有免疫調節(jié)及神經(jīng)保護作用，可成為ASD的一種潛在生物治療手段。而MSCs的治療效果主要是通過其包含重要分子信息的外泌體介導的，除了具有MSCs所具有的免疫調節(jié)及神經(jīng)保護作用外，MSC-Exos還可以調節(jié)外周巨噬細胞抗炎狀態(tài)的改變及釋放多種因子促血管生成改善大腦微環(huán)境，且進一步的基因分析發(fā)現(xiàn)其各種功能在基因產(chǎn)物和miRNA上的表達。相較于MSCs，無細胞治療的MSC-Exos具有更多的優(yōu)勢，且對ASD的療效也在一些動物實驗中得到了肯定。雖然MSCs-Exos治療ASD的初步研究已經(jīng)得到了一定的進展，但仍存在以下局限性：首先，目前對ASD復雜的病理生理機制仍不清楚，MSC-Exos是否在除ASD免疫炎癥機制外的其他方面發(fā)病機制中發(fā)揮作用仍未可知。其次，研究仍處于理論和實驗階段，缺乏大量的動物實驗和臨床試驗。最后，MSC-Exos長期應用的安全性還需要大量的研究驗證，包括給藥途徑、單次劑量以及干預年齡等臨床轉化的問題仍需進一步研究和探討。參考文獻（略）