目前三叉神經(jīng)痛的治療方式比較多，有藥物(卡馬西平），外科手術(shù)以及伽瑪?shù)吨委?，外科手術(shù)又有多種。對各種療法評估總結(jié)，三叉神經(jīng)痛的診斷尤為重要，多數(shù)對卡馬西平有良好效果，但長期服藥對身體的損害不容忽視。微血管減壓術(shù)，在一個有經(jīng)驗的單位，開顱但不開腦，手術(shù)基本不出血，一般而言不會有神經(jīng)的額外損害，是除外有凝血障礙患者的第一選擇。

膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)腦腫瘤，也是目前神經(jīng)腫瘤領(lǐng)域內(nèi)的難點。傳統(tǒng)上，膠質(zhì)瘤主要通過形態(tài)學進行分類與分級。但越來越多研究顯示，基于形態(tài)學的病理分類并不能很好的反映某些膠質(zhì)瘤的生物學特性。例如，有些病理上診斷為低級別的膠質(zhì)瘤（良性），短期內(nèi)復發(fā)與進展，而有些高級別膠質(zhì)瘤（惡性）卻可以長期保持穩(wěn)定。又如，部分膠質(zhì)瘤對放化療特別敏感，而同樣是相同惡性度的膠質(zhì)瘤卻對治療無效。如何準確的預測膠質(zhì)瘤患者的預后及選擇合適治療方案，是目前基礎(chǔ)與臨床的工作重點。隨著分子生物學的發(fā)展，我們已能夠在分子水平對膠質(zhì)瘤進行“解剖”，并且發(fā)現(xiàn)了一些能夠預測膠質(zhì)瘤患者預后及治療反應(yīng)的分子標記，如1p19q雜合性缺失（詳見本網(wǎng)站相應(yīng)博文）及MGMT。 為了能夠科學規(guī)范的檢測及使用分子標記物，中國膠質(zhì)瘤協(xié)作組經(jīng)過1年多的醞釀，組織國內(nèi)膠質(zhì)瘤領(lǐng)域內(nèi)的專家撰寫了《中國腦膠質(zhì)瘤分子診療指南》，并發(fā)表于《中華神經(jīng)外科雜志》2014年第5期。作為指南的編寫組成員，我體會到，國內(nèi)在膠質(zhì)瘤診療方面上升到一個新的高度，基本達到歐美發(fā)達國家水平。以下是本指南的主要內(nèi)容，供患者及醫(yī)務(wù)人員參考。一、意義和背景制訂本指南的目的是建立以循證醫(yī)學為基礎(chǔ)的腦膠質(zhì)瘤分子檢測分析體系，描述最普遍的膠質(zhì)瘤相關(guān)的分子改變、潛在的治療靶點和生物標志物，從而用于指導臨床實踐并做出治療選擇。對于哪一個（類）患者或者樣本需要進行檢測，何時檢測和如何檢測，本指南中也給出了推薦。 臨床實踐指南( clinical practice guideline，CPG)，不同于臨床隨機對照試驗，是在特定的臨床條件下經(jīng)過系統(tǒng)的分析后形成的診療指南，能夠有效地幫助臨床醫(yī)生做出準確的診斷，并選擇合適的治療方案。指南應(yīng)滿足：清晰性、有效性、可靠性、可重復性、應(yīng)用靈活性、多學科融合、有依據(jù)性和可作為指導性。臨床實踐指南的目標是服務(wù)于臨床工作，從而改善患者的臨床預后，并為醫(yī)療教育提供指導，為療效評估、專業(yè)審核提供依據(jù)，為合理治療和建立臨床路徑提供幫助。 二、前言腦膠質(zhì)瘤是最常見的原發(fā)性腦腫瘤，其中一半以上為惡性度最高的膠質(zhì)母細胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）。GBM患者即使采用了最為積極的治療手段，中位生存期仍然少于15個月。近年來，神經(jīng)腫瘤分子病理取得了重大進展，目前已發(fā)現(xiàn)一系列有助于腦膠質(zhì)瘤臨床診斷和預后判斷的分子標志物。目前的WHO病理分級仍然依賴形態(tài)學進行腫瘤分級，然而，有充分的證據(jù)表明，組織特征相同或相似的膠質(zhì)瘤可以具有不同的分子遺傳學背景，導致WHO分級相同的個體間預后有著較大差異?；谀[瘤遺傳學水平的分子病理分型能夠更準確地判斷臨床預后；并且對組織學上較難鑒別的混合性膠質(zhì)瘤（少突星形細胞瘤和間變性少突星形細胞瘤）還能幫助明確診斷和分級。另外，這些新近發(fā)現(xiàn)的分子變異有可能成為未來治療的新靶點。近10年來，盡管腦膠質(zhì)瘤的基礎(chǔ)和臨床研究有了較大突破，但是彌漫性膠質(zhì)瘤患者預后的改善仍然十分緩慢。進一步了解膠質(zhì)瘤的分子生物學特征，通過臨床試驗明確更多潛在的分子標志物，有望揭開腦膠質(zhì)瘤病理生理和發(fā)病機制的神秘面紗。除了種族、性別、年齡、生活習慣等臨床常見因素，重要的分子標志物的篩選，對臨床應(yīng)用均有深遠的意義。指南由資深專家參與擬訂，可靠性、實用性強，指南中的分子標志物是治療的靶點、預測因子或判斷預后的指標，也能作為制訂行業(yè)規(guī)范的依據(jù)。三、流行病學膠質(zhì)瘤占所有原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的32%，占中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤的81%。惡性膠質(zhì)瘤的發(fā)病率為(5 -8)/100萬，5年病死率在全身腫瘤中僅次于胰腺癌和肺癌，位列第3位。世界衛(wèi)生組織1998年公布按腫瘤致死率排序，惡性膠質(zhì)瘤是34歲以下腫瘤患者的第2位死亡原因，是35 -54歲患者的第3位死亡原因。2012年中國腫瘤登記報告指出中國腦及中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤死亡率為3. 87/10萬，位列十大高病死率腫瘤之第9位。以惡性膠質(zhì)瘤為代表中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤造成了巨大的社會經(jīng)濟及家庭負擔，一直是當今腫瘤研究的熱點。四、現(xiàn)有的膠質(zhì)瘤分類系統(tǒng)膠質(zhì)瘤是指來源于膠質(zhì)細胞的腫瘤，本指南中特指來源于星形膠質(zhì)細胞或少突膠質(zhì)細胞的腫瘤。根據(jù)腫瘤生長方式，膠質(zhì)瘤可以分為兩類：局限性膠質(zhì)瘤（毛細胞型星形細胞瘤）與彌漫性膠質(zhì)瘤。根據(jù)WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類（2007年，第四版），彌漫性膠質(zhì)瘤可以分為Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ級。病理特征：彌漫性星形細胞瘤（WHOⅡ級）具有大量增生的膠質(zhì)纖維，伴有輕中度核異型和明顯活躍的核分裂象。少突膠質(zhì)細胞瘤（WHOⅡ級）表現(xiàn)為細胞邊界清楚、胞漿透明，有位于細胞中央的圓形細胞核，呈蜂巢樣排列。間變性少突膠質(zhì)細胞瘤（WHOⅢ級）表現(xiàn)為明顯的細胞核異型性和血管增生。CBM（多形性膠質(zhì)母細胞瘤，WHOⅣ級），作為最有侵襲性的膠質(zhì)瘤，表現(xiàn)為有瘤組織內(nèi)細胞豐富，瘤細胞大，明顯核異型，核分裂多見，血管內(nèi)皮細胞增生，可見大量的不成熟血管，可合并大片出血和壞死。原發(fā)的GBM多發(fā)生于55歲以上的中老年患者，而繼發(fā)的GBM多發(fā)生于年齡小于55歲患者中，是由低級別膠質(zhì)瘤發(fā)展而來，占CBM的5.0% -10%。WHOⅡ級和WHOⅢ級膠質(zhì)瘤發(fā)展成GBM的時間平均為5年和2年。在分子病理水平上，原發(fā)GBM(5.0%)的IDH突變明顯低于繼發(fā)GBM(84.6%)。五、當前的治療方法目前治療指南建議對膠質(zhì)瘤采用手術(shù)和（或）放療和（或）化療的綜合治療方式。手術(shù)推薦最大程度安全切除腫瘤；放療推薦分次外照射；化療推薦替莫唑胺（TMZ）化療。替莫唑胺是相對耐受良好的口服烷化藥劑，易通過血腦屏障，在細胞內(nèi)轉(zhuǎn)化為強效的烷化劑，使鳥嘌呤烷基化，損傷DNA，導致瘤細胞死亡。現(xiàn)有的標準治療還未達到個體化治療的水平。六、膠質(zhì)瘤分子標志物（表1）（一）IDH突變1．背景：異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenase，IDH）是三羧酸循環(huán)中的一種關(guān)鍵性限速酶，催化異檸檬酸( isocitrate)氧化脫羧生成a-酮戊二酸(a-KC)及C02，為細胞新陳代謝提供能量和生物合成的前體物質(zhì)。IDH基因家族有三種異構(gòu)酶（IDHI，IDH2和IDH3）。IDHI催化反應(yīng)生成的產(chǎn)物包括a-KG和還原型輔酶Ⅱ(NADPH)，NADPH作為體內(nèi)還原性氫的供體一方面參與了細胞抵御氧化應(yīng)激反應(yīng)；另一方面還參與了不飽和脂肪酸的氧化過程。a一酮戊二酸可能與膠質(zhì)瘤的發(fā)生有關(guān)。IDHI和IDH2的突變在原發(fā)性GBM中發(fā)生率很低(5. 0%)，但是在繼發(fā)性CBM( 84. 6%)和WHOⅡ級、Ⅲ級膠質(zhì)瘤(星形細胞瘤(83.3%)、少突膠質(zhì)細胞瘤(80.4%)、少突星形細胞瘤(100%)、間變性星形細胞瘤(69.2%)、間變性少突膠質(zhì)細胞瘤(86. 1%))中發(fā)生率很高。IDHI/IDH2突變發(fā)生在膠質(zhì)瘤形成的早期，隨后根據(jù)星形細胞或少突膠質(zhì)細胞的譜系分化不同可以分別伴隨TP53基因突變或lp/19q雜合性缺失。在繼發(fā)性GBM和低級別彌漫性膠質(zhì)瘤中，IDHI/IDH2基因突變與TP53突變、染色體lp19q雜合性缺失以及06_甲基鳥嘌呤-DNA-甲基轉(zhuǎn)移酶( MGMT)啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)呈正相關(guān)；在原發(fā)性CBM中，IDHI基因的突變與10號染色體缺失和ECFR擴增呈負相關(guān)。IDHI/IDH2突變獨立于常規(guī)預后指標包括染色體lp/19q狀態(tài)及MCMT基因啟動子甲基化，與較長的無進展生存期有關(guān)。IDHl/IDH2基因的突變通常發(fā)生在年輕成年人和青少年彌漫性膠質(zhì)瘤患者中。超過90%的IDH基因突變?yōu)镮DHI突變（以R132類型最為常見），其余的為IDH2突變，IDH2突變發(fā)生在同源的密碼子（密碼子172），至今未有IDH3突變的報道。含有IDH基因突變的高級別膠質(zhì)瘤有顯著較好的預后。IDH突變狀態(tài)對膠質(zhì)瘤預后的影響被認為優(yōu)于組織學分級。IDHl/IDH2突變對間變性星形細胞瘤和GBM的預后有很強的預測價值：IDHl/IDH2突變的間變性星形細胞瘤和GBM的生存期分別為65與20個月，而IDHl/IDH2野生型的間變性星形細胞瘤和GBM的生存期僅為31與15個月。雖然IDH突變對高級別膠質(zhì)瘤的預后有很強的預測價值，但是對于低級別彌漫性膠質(zhì)瘤預后作用還不明確。IDHl( R132H)突變占IDH總突變的90%以上，它是由IDH1基因第395位的鳥嘌呤突變?yōu)橄汆堰?CGT—CAT)，進而導致編碼蛋白中第132位精氨酸(R)被組氨酸(H)取代所造成。IDHl的這種突變多發(fā)生于青年患者和繼發(fā)性GBM患者，并且發(fā)生突變與患者的總生存率成正相關(guān)，野生型IDHI患者平均存活時間僅I.I年，而突變型IDHI患者平均存活時間則長達3.8年。IDHI突變在膠質(zhì)瘤中具有普遍性，針對IDH突變蛋白的抗體已經(jīng)成為檢測IDH突變情況的常規(guī)手段?？紤]到突變體特異性抗體的可靠性，可以用免疫組織化學方法評估IDH( R132H)蛋白表達，若結(jié)果顯示陽性，可以看作存在突變；若結(jié)果顯示陰性，可以進一步檢測132和172氨基酸的IDHI和IDH2序列來排除突變。此外，IDH突變在GBM年輕患者發(fā)生率較高，建議50歲以下的GBM患者首選檢測。2．實驗室檢測方法：在基因水平，可采用焦磷酸測序；在蛋白質(zhì)水平，可采用免疫組織化學法。推薦使用焦磷酸測序。3．建議：在各級別膠質(zhì)瘤中，相對于IDH野生型，IDH突變型的患者預后較好。IDH突變狀態(tài)可輔助診斷膠質(zhì)瘤。（二）MGMT啟動子甲基化1．背景：06-甲基鳥嘌呤-DNA-甲基轉(zhuǎn)移酶(06-methylguanine-DNA methyltransferase, MGMT)定位于lOq26,編碼一種修復06_甲基鳥嘌呤的酶。其啟動子包括富含97個CG二核苷酸（cpG位點）的CpG島。在正常組織中，cpG位點一般都處在非甲基化狀態(tài)。CpG位點甲基化會導致染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變，從而阻止轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、導致基因的沉默。MGMT主要分布于細胞質(zhì)，DNA損傷后才轉(zhuǎn)移到細胞核。在細胞核中，MGMT可以使烷化劑作用下形成的06位甲基化鳥嘌呤去甲基化，有效地修復DNA損傷，同時自身不可逆失活為烷基化MGMT。MGMT -個分子只能修復一個烷基加合物，因此，MGMT被稱為“自殺”酶。細胞的修復能力取決于MGMT在細胞內(nèi)的含量和合成速率，而MGMT基因啟動子甲基化可以導致基因沉默和抑制蛋白合成，阻礙DNA的修復。MGMT啟動子甲基化在少突膠質(zhì)細胞瘤中發(fā)生率為60%- 80%，在混合性少突星形細胞瘤發(fā)生率為60% -70%，在GBM發(fā)生率為20% -45%，在間變性星形細胞瘤中發(fā)生率為40%- 50%，在毛細胞型星形細胞瘤發(fā)生率為20% - 30%。在繼發(fā)性GBM和低級別彌漫性膠質(zhì)瘤中，MGMT啟動子甲基化狀態(tài)與IDH基因突變 和lp/19q缺失的狀態(tài)呈正相關(guān)。復發(fā)膠質(zhì)瘤樣本中MGMT啟動子甲基化水平較第一次手術(shù)樣本多有明顯的增加，但膠質(zhì)瘤患者的中位生存期只受初治膠質(zhì)瘤中MGMT啟動子甲基化狀態(tài)的影響。在TCGA（癌癥圖譜研究網(wǎng)絡(luò)）進行的一項大樣本、多中心的原發(fā)性GBM研究中，存在MGMT甲基化的CBM患者放化療后基因組發(fā)生了大量的突變，其中包括錯配修復(MMR)基因突變，而MCMT蛋白無法修復突變。高級別膠質(zhì)瘤放療聯(lián)合TMZ同步化療后，影像學上常常出現(xiàn)和腫瘤進展酷似的假性進展，MCMT甲基化者假性進展的發(fā)生率明顯高于非甲基化者，同時假性進展的出現(xiàn)提示預后較好。具有MGMT啟動子甲基化的膠質(zhì)瘤患者對化療、放療敏感，生存期較長。對于70歲以上GBM患者，若KPS評分低于70分，在可耐受的情況下應(yīng)用替莫唑胺治療可延緩復發(fā)并延長總生存期，改善生存質(zhì)量；若同時伴有MGMT啟動子甲基化，則替莫唑胺效果更佳。老年GBM患者中MGMT基因啟動子甲基化發(fā)生率高，單純放療聯(lián)合輔助化療可以延長生存期，而無MGMT基因啟動子甲基化的老年患者輔助化療并沒有延長生存期。2．實驗室檢測方法：焦磷酸測序或甲基化特異性PCR是評估MGMT啟動子甲基化狀態(tài)的最佳選擇。用免疫組織化學檢測MGMT蛋白表達從而推測MGMT啟動子區(qū)甲基化狀態(tài)并不可靠。推薦焦磷酸測序的方法。3．建議：MGMT啟動子甲基化提示GBM患者預后較好。對于年齡>70歲的老年患者，如果有MGMT啟動子甲基化，放療聯(lián)合輔助化療或單純化療可以延長生存期，改善生活質(zhì)量；無MGMT啟動子甲基化的老年患者不建議輔助化療。（三）染色體lp/19q缺失1．背景：染色體lp/19q聯(lián)合性缺失(codeletion)是指1號染色體短臂和19號染色體長臂同時缺失，最早發(fā)現(xiàn)于少突膠質(zhì)細胞瘤樣本中。lp/19q聯(lián)合性缺失在少突膠質(zhì)細胞瘤中的發(fā)生率為80% -90%，在間變性少突膠質(zhì)細胞瘤中發(fā)生率為50%- 70% ，在彌漫性星形細胞瘤中發(fā)生率為15%，而在膠質(zhì)母細胞瘤中發(fā)生率僅為5.0%。具有l(wèi)p/19q聯(lián)合性缺失的少突膠質(zhì)細胞瘤患者通常伴隨著IDH基因的突變，MGMT啟動子甲基化，和G-CpG島甲基化表型( G-CIMP) ，但是與TP53突變相互獨立發(fā)生。目前認為lp/19q聯(lián)合性缺失是少突膠質(zhì)細胞瘤的分子特征，是其診斷性分子標志物。通常對疑似少突膠質(zhì)細胞瘤或混合性少突星形細胞瘤均應(yīng)進行l(wèi)p/19q聯(lián)合性缺失的檢測，從而協(xié)助組織學的診斷，lp/19q缺失可以幫助區(qū)分混合性少突星形細胞瘤更傾向于少突還是星形，這對于治療選擇有一定的意義。存在lp/19q聯(lián)合性缺失的少突膠質(zhì)細胞瘤生長速度較慢，并對化療敏感。目前的治療指南對少突膠質(zhì)細胞瘤均推薦檢測lp/19q聯(lián)合性缺失的狀態(tài)，用替莫唑胺或單純放療治療lp/19q聯(lián)合性缺失的少突膠質(zhì)細胞瘤的患者均會延長無進展生存期，僅有l(wèi)p缺失的患者進行單一治療的時候也會延長無進展生存期。一項1000例病例的大規(guī)模的國際臨床回顧性研究表明，對lp/19q聯(lián)合性缺失的間變性少突膠質(zhì)細胞瘤患者進行替莫唑胺(TMZ)單純化療和PCV聯(lián)合放化療，PCV化療方案（甲基芐肼+洛莫司汀+長春新堿）比TMZ化療方案對腫瘤控制更好，但是否能夠延長存活期并不明確。對于伴有l(wèi)p/19q聯(lián)合性缺失、無癥狀的少突膠質(zhì)細胞瘤患者，腫瘤生長緩慢并且總生存期長，一部分醫(yī)師選擇了臨床觀察。而對于有癥狀的患者，治療效果較好，治療后能改善癥狀、提高生活質(zhì)量。2．實驗室檢測方法：實驗室檢測lp/19q狀態(tài)的方法包括熒光原位雜交、基于雜合性缺失分析的聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)和陣列比較基因組雜交(CGH)。推薦采用熒光原位雜交技術(shù)。3．建議：對于有l(wèi)p/19q聯(lián)合缺失的少突或間變性少突膠質(zhì)細胞瘤患者，推薦化療或聯(lián)合放化療。（四）EGFR擴增和EGFRvⅢ重排1．背景：表皮生長因子受體( epidermal growth factorreceptor，EGFR)基因定位于染色體7p12，編碼一種跨膜酪氨酸激酶受體( EGFR/Erb/Herl)。EGFR編碼蛋白有三個功能結(jié)構(gòu)域：分別是細胞外段的氨基酸結(jié)合區(qū)、跨膜區(qū)和細胞內(nèi)段的酪氨酸激酶區(qū)。EGFR與EGF、TGF-a或雙調(diào)蛋白( amphiregulin，AR)的結(jié)合后使酪氨酸激酶磷酸化，進一步激活胞內(nèi)下游信號通路(促分裂原活化蛋白激酶( MAPK)和磷脂酰肌醇3激酶( PI3K)，從而促進細胞增殖、遷移。EGFR擴增在許多癌癥中的發(fā)生并不普遍，而在腦膠質(zhì)瘤中確有很高的發(fā)生率，并常常伴隨編碼蛋白的過表達。間變性星形細胞瘤中EGFR擴增的發(fā)生率為17%，GBM中的發(fā)生率為50%- 60%，TCGA的經(jīng)典型與Phillips增殖型和間質(zhì)型的發(fā)生率高達94%。組織學上，小細胞GBM中GFAP表達很低，從形態(tài)學上難以和高級別的少突膠質(zhì)細胞瘤相鑒別。由于小細胞GBM中EGFR擴增很普遍，據(jù)此能鑒別診斷小細胞GBM與高級別的少突膠質(zhì)細胞瘤。對于臨床癥狀和神經(jīng)影像學提示診斷為GBM的患者，由于取材的局限導致組織病例學上不能充分的證明是GBM，針對EGFR擴增進行檢測就能確診或排除GBM的診斷。FISH可以確定的檢測EGFR擴增，所以可作為判定腫瘤級別的一個備選指標。在臨床上，60歲的CBM患者伴隨EGFR擴增提示預后不良。存在ECFR擴增的腫瘤可以伴發(fā)其他EGFR基因的改變，最常見的是外顯子2-7框內(nèi)缺失形成的EGFRvⅢ重排，EGFRvⅢ重排在GBM患者的發(fā)生率為20% - 30%。EGFR的擴增會導致EGFRvⅢ成為截斷體蛋白，從而不能綁定配體的短胞外區(qū)。由于降解能力受損和激酶活性增加，EGFRvⅢ重排能夠激活下游信號轉(zhuǎn)導通路。EGFRvⅢ重排是否與預后相關(guān)還存在著爭議，但是長期來看，有EGFRvⅢ重排的患者預后有差的趨勢。至今EGFR的靶向治療對治療GBM還沒有明顯的療效，然而EGFRvⅢ重排給我們提供了一個靶向治療的平臺，多個二期臨床試驗已經(jīng)發(fā)現(xiàn)針對于EGFRvⅢ重排的疫苗能夠改善患者的預后?，F(xiàn)在，三期臨床試驗(ClinicaITrials. gov，No.NCT01480479)正在進行。對于EGFRvⅢ重排陽性的GBM患者，可通過監(jiān)測外周血EGFRvⅢ重排來觀察治療反應(yīng)并能監(jiān)測是否復發(fā)。未來針對于EGFRvⅢ重排的疫苗有望改善EGFRvⅢ重排陽性患者的預后。2．實驗室檢測方法：EGFR擴增：熒光原位雜交；EGFRvⅢ重排：實時定量PCR，免疫組織化學，多重探針依賴式擴增技術(shù)。推薦使用熒光原位雜交檢測EGFR重排。3．建議：有EGFR擴增的大于60歲的GBM患者預后差，診斷方面的意義表現(xiàn)在兩方面：對小細胞GBM的診斷；輔助判定活檢組織的病理結(jié)果。（五）PTEN基因突變1．背景：磷酸酯酶與張力蛋白同源物( phosphatase andtensin homolog，PTEN)，定位于染色體lOq23.3，是蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶（protein tyrosine phosphatases，PTP）基因家族成員，其蛋白產(chǎn)物為含有一酪蛋白磷酸酶的功能區(qū)和約175個氨基酸左右的與骨架蛋白tenasin、auxilin同源的區(qū)域。PTEN是重要的抑癌基因，于1997年首次被報道，是迄今發(fā)現(xiàn)的第一個具有雙特異磷酸酶活性的抑癌基因，也是繼TP53基因后另一個較為廣泛地與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切的基因。PTEN蛋白是磷酸酶，它使蛋白質(zhì)去磷酸化而發(fā)揮作用。PTEN參與信號通路的轉(zhuǎn)導，在細胞生長、分裂的速度過快或者分裂不受控制時，能夠調(diào)控細胞分裂周期，使細胞停止分裂并誘導凋亡，這些功能可以阻止細胞的異常增殖進而限制腫瘤的形成。PTEN還可以輔助抑制細胞轉(zhuǎn)移、細胞與周圍基質(zhì)的粘附和血管發(fā)生等功能。此外，它在維持細胞遺傳信息的穩(wěn)定性上也可能具有重要作用。PTEN基因是眾多腫瘤預后的評價指標，研究其作用機制對腫瘤的診斷及其基因治療具有重要意義。PTEN參與了RTK/PI3K通路，86%的GBM患者會有包括PTEN基因缺失和突變的RTK/PI3K通路基因的改變。在原發(fā)性GBM中PTEN的點突變率為26% - 34%。間變性星形細胞瘤(18%)突變率明顯少于GBM。有PTEN突變的間變性星形細胞瘤患者預后較差。2．實驗室檢測方法：對外顯子區(qū)域進行PCR，Sanger測序檢測PTEN突變。3．建議：建議對WHOⅢ級和Ⅳ級的膠質(zhì)瘤樣本檢測PTEN的突變。有PTEN突變的間變性星形細胞瘤患者預后較差。（六）TP53基因突變 1．背景：TP53為抑癌基因，定位于染色體17p13.1，編碼蛋白稱為p53蛋白或p53腫瘤蛋白。p53蛋白能調(diào)節(jié)細胞周期和避免細胞癌變發(fā)生。超過50%的人類腫瘤涉及TP53基因突變的發(fā)生。TP53基因突變在低級別星形細胞瘤中發(fā)生率為50% - 60%，在少突膠質(zhì)細胞瘤中TP53基因突變發(fā)生率很低，混合性少突星形細胞瘤發(fā)生率為40%，繼發(fā)性GBM發(fā)生率為70%，原發(fā)性GBM發(fā)生率為25% -37%。在低級別星形細胞瘤和繼發(fā)性GBM中，TP53基因突變多在膠質(zhì)瘤形成早期發(fā)生，而在原發(fā)性GBM中，TP53基因突變多在膠質(zhì)瘤形成后期發(fā)生，主要是由于基因組的不穩(wěn)定性增加導致。在彌漫性膠質(zhì)瘤患者中TP53突變是生存率降低的原因。對于低級別膠質(zhì)瘤而言，TP53突變提示預后較差，但是對GBM而言并沒有預測價值。目前p53蛋白的表達已被作為診斷的生物標志物，可通過福爾馬林固定、石蠟包埋的組織定期免疫組織化學檢測。然而，其免疫組織化學的結(jié)果必須結(jié)合詳盡的臨床信息進行分析，因為無證據(jù)證明基因突變和蛋白的過度表達具有相關(guān)性，蛋白的過度表達并不能用來推斷TP53突變狀態(tài)。p53在未來有可能成為藥物靶點，提高腫瘤細胞對化療的敏感性，這還有待進一步的研究。2．實驗室檢測方法：對外顯子區(qū)域進行PCR，Sanger測序檢測TP53突變。3．建議：TP53突變在低級別星形細胞瘤和繼發(fā)GBM中發(fā)生率高。有TP53突變的低級別膠質(zhì)瘤預后較差。（七）BRAF融合和點突變1．背景：BRAF基因位于7q34，長約190 kb。BRAF基因編碼一種絲／蘇氨酸特異性激酶( serine/theronine specific kinase)。BRAF基因是RAF家族的成員之一，RAF家族還包括ARAF和RAFl( CRAF)基因，是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK通路重要的轉(zhuǎn)導因子，參與調(diào)控細胞內(nèi)多種生物學事件，如細胞生長、分化和凋亡等。BRAF蛋白由783個氨基酸組成，功能上從N端到C端依次為RAS結(jié)合區(qū)、富半胱氨酸區(qū)( Cys)、甘氨酸環(huán)(Cloop)和激活區(qū)。在絕大多數(shù)組織和細胞類型中，BRAF是MEK/ERK最為關(guān)鍵的激活因子。它主要有CRI、CR2和CR3三個保守區(qū)。其中CR1區(qū)含RBD區(qū)（Ras-binding domain，RAS蛋白結(jié)合區(qū)）和富半胱氨酸區(qū)( Cys)；CR3區(qū)為激酶結(jié)構(gòu)域，含甘氨酸環(huán)(Gloop)，為ATP結(jié)合位點和激活區(qū)，該區(qū)T598和S601兩個位點的磷酸化對BRAF蛋白的激活至關(guān)重要。BRAF蛋白的主要磷酸化位點為S364、S428、T439、T598和S601。BRAF蛋白的完全活化需要T598和S601兩個位點的磷酸化，這兩個位點氨基酸的置換將導致激酶持續(xù)性激活。此外，該兩個位點的磷酸化對于ERK的BRAF誘導性激活以及NIH3rl3的轉(zhuǎn)化亦很重要。BRAF基因的串聯(lián)重復導致了基因的融合，如KIAA1549-BRAF和FAM13IB-BRAF（少見）。KIAA1549-BRAF融合在毛細胞型星形細胞瘤中高發(fā)（50% - 70%），而在其他級別膠質(zhì)瘤或其他腫瘤中極為少見。KIAA1549-BRAF融合是一個重要的診斷標志物，由于毛細胞型細胞瘤也存在微血管的增生，在組織學上難以與CBM區(qū)分，如果檢測有KIAA1549-BRAF融合則高度提示為毛細胞型星形細胞瘤。在各個級別的膠質(zhì)瘤中，均檢測到了BRAF發(fā)生在Va1600Glu位點的錯義突變。通過針對該種突變的特異性抗體的免疫組織化學檢測發(fā)現(xiàn)，多形性黃色瘤型星形細胞瘤中約有60% - 70%發(fā)生該突變，是突變最多的一種星形細胞瘤。 在毛細胞型星形細胞瘤中發(fā)生率為10%，其他膠質(zhì)瘤中少見。針對于Va1600Clu突變的藥物，如威羅菲尼(vemurafenib)，為存在BRAF突變的膠質(zhì)瘤的治療提供了新的治療方式。2．實驗室檢測方法：KIAA1549-BRAF基因融合：熒光原位雜交，實時定量PCR；BRAFVa1600Glu突變：免疫組織化學，焦磷酸測序。3．建議：KIAA1549-BRAF融合基因和BRAF Va1600Glu突變與毛細胞型星形細胞瘤密切相關(guān)，具有很強的診斷價值；是靶向治療的標志物。 （八）Ki-671．背景：Ki-67是一種增殖細胞相關(guān)的核抗原，其功能與有絲分裂密切相關(guān)，在細胞增殖中是不可缺少的。Ki-67作為標記細胞增殖狀態(tài)的抗原，其染色陽性說明癌細胞增殖活躍。Ki-67蛋白存在于所有的有活性的細胞周期中(G1，S，G2，M)，而不存在于靜止期(GO)。Ki-67已經(jīng)作為判定增殖細胞數(shù)比例的指標。然而至今為止，并沒有確定的閾值作為評定腫瘤級別的指標。Ki-67表達水平均能較客觀地反應(yīng)腦腫瘤的增殖速度和惡性程度，但WHO指南至今仍舊根據(jù)有絲分裂的活性來區(qū)別II級和Ⅲ級的腫瘤?，F(xiàn)在多使用免疫組織化學技術(shù)檢測Ki-67蛋白，這在病理診斷中已獲得普遍認可，在許多腫瘤中，Ki-67陽性標記指數(shù)對于區(qū)別良惡性、確定分級都有參考價值?？傮w說來，Ki-67陽性標記指數(shù)越高，則惡性程度（分級）越高，預后越差。在不同腫瘤中，其良惡性之間、不同級別之間，陽性標記指數(shù)總有一些重疊交叉，而且不同研究者所得的結(jié)果還常有相當大的差別，很難一概而論。一般主張選擇腫瘤細胞豐富、陽性細胞（定位于細胞核）較多的熱點區(qū)域，選擇至少10個高倍視野，計算這些視野內(nèi)腫瘤細胞中陽性細胞的平均值(%)，作為Ki-67陽性標記指數(shù)。在膠質(zhì)瘤中，高級別膠質(zhì)瘤的Ki-67代表的陽性標記指數(shù)明顯高于低級別膠質(zhì)瘤。早期及近期研究揭示Ki-67和磷酸化組蛋白H3在彌漫性腦膠質(zhì)瘤中有預后價值，尤其是低級別彌漫性膠質(zhì)瘤。在間變性少突膠質(zhì)細胞瘤中，Ki-67是一個重要的單因素分析預后指標，而不是多因素分析預后指標。2．實驗室檢測方法：免疫組織化學。3．建議：對于低級別彌漫性膠質(zhì)瘤是一個預測預后的可靠指標（九）miR-18ld1．背景：微小RNA( miRNAs)是在真核生物中發(fā)現(xiàn)的一類內(nèi)源性的具有調(diào)控功能的非編碼RNA，約20 - 25個核苷酸。成熟的miRNAs可以降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻譯。miRNA參與了各種各樣的調(diào)節(jié)途徑，包括發(fā)育、病毒防御、造血過程、器官形成、細胞增殖和凋亡、脂肪代謝等等。miRNA可以擔任抑癌基因或癌基因．與腫瘤的惡性進展有著密切的聯(lián)系。中國膠質(zhì)瘤基因組圖譜計劃( ChineseGlioma Genome Atlas，CGGA)與美國波士頓貝斯醫(yī)療中心合作研究發(fā)現(xiàn)：與正常腦組織相比，膠質(zhì)瘤中的miR-18ld表達明顯下調(diào)，尤其是在GBM中，這個結(jié)果在TCGA和獨立樣本中也得到了證實，miR-18ld連同其他4個miRNA -同可以預測GBM患者的預后。miR-18ld能夠抑制膠質(zhì)瘤的增殖、促進細胞周期停滯并促進凋亡。已證明miR-18ld有多個靶基因，與腫瘤相關(guān)的靶點包括KRAS、BCL-2和MGMT。miR-18ld能夠負調(diào)控MGMT mRNA的翻譯，從而使其表達下調(diào)，同時在腫瘤樣本中miR-18ld與MGMT的表達呈負相關(guān)。miR-18ld高表達的患者組的中位生存期明顯比低表達的組群長；表達上調(diào)的miR-18ld能夠增加GBM對替莫唑胺的敏感性，部分的原因是miR-18ld下調(diào)MGMT的作用。MGMT有修復DNA損傷的功能，而替莫唑胺能夠促進GBM的DNA損傷，miR-18ld通過下調(diào)MGMT達到了提高GBM對替莫唑胺敏感性的作用。miR-18ld對于替莫唑胺治療效果是一個預測因子。同時，miR-18ld的其他靶基因的作用也參與其抗腫瘤作用機制中。在GBM中miR-18ld高表達提示預后較好。2．實驗室檢測方法：原位雜交。 3．建議：miR-18ld對于GBM是一個預測預后的可靠指標。臨床檢測miR-18ld的表達水平能提示GBM患者對TMZ化療的敏感性。七、根據(jù)特定基因分類的膠質(zhì)瘤亞型 膠質(zhì)瘤分子基因表達研究的進一步開展，將為膠質(zhì)瘤分類與新型分子治療靶點的尋找提供更多的依據(jù)。Phillips等在一項107例膠質(zhì)瘤（WHOⅢ和Ⅳ級）的研究中，用35個基因?qū)⒛z質(zhì)瘤分為三個亞型：前神經(jīng)元型，增殖型和間質(zhì)型。前神經(jīng)元型表達神經(jīng)發(fā)生相關(guān)的基因），具有完整的PTEN、正常的EGFR和Notch信號通路，常發(fā)生在40歲左右的人群中，有較好的預后。 增殖型與間質(zhì)型腫瘤分別表達細胞增殖和血管生成／間質(zhì)相關(guān)的基因，如10號染色體缺失，7號染色體的擴增，PTEN基因的缺失，正常或擴增的EGFR基因和Akt的活化。常發(fā)生在年齡稍大的人群中(>50歲)，有不良的預后。Verhaak等在分析了癌癥基因圖譜計劃( The Cancer Genome Atlas，TCGA)中202例GBM的表達譜后，利用了840個基因，將GBM分為四個亞型：前神經(jīng)元型、神經(jīng)元型、經(jīng)典型和間質(zhì)型。前神經(jīng)元型的發(fā)生率較低，有少突膠質(zhì)細胞的特性，主要發(fā)生在繼發(fā)性GBM年輕患者中，其主要特點是IDH突變、TP53基因突變和lp/19q雜合性缺失、PDGFR-A改變、10號染色體缺失和7號染色體擴增。神經(jīng)亞型表現(xiàn)為表達神經(jīng)元相關(guān)基因，包含有星形細胞和少突細胞，其主要特點是ECFR擴增(5/19，26%)，它的表達模式和正常腦組織樣本是最相似的。經(jīng)典亞型表達了神經(jīng)前體和干細胞的標志物，具有星形細胞的特性，其特點是7號染色體擴增和10號染色體的缺失( 93%)，EGFR擴增(95%)，TP53缺失，激活的Notch和shh( Sonic hedgehogsignaling)信號通路，PTEN缺失(5/22，230-/0)和EGFRvⅢ重排( 5/22，23%)。間質(zhì)亞型具有培養(yǎng)的星形細胞瘤的特點，包括PTEN缺失(12/38，32%)，NFI基因突變(14/38，37%)，壞死和炎性反應(yīng)的增加。中國腦膠質(zhì)瘤基因組圖譜計劃( chinese glioma genome atlas，CCGA)共利用了225例腦膠質(zhì)瘤的樣本進行了分子亞分型，將腦膠質(zhì)瘤分為了三個亞型（G1，G2和G3）。G1亞型包含了極度高發(fā)的IDH突變，主要見于年輕的患者，有良好的預后。而相對于G1亞型，G3亞型預后較差，主要見于年老的患者，包含了非常低的IDH突變率。G2亞型的以上臨床特點介于CI和G3亞型之間，但是lp/19q的缺失在C2亞型中比G1和C3的發(fā)生率要高。上述分型使用TCGA和Rembrandt的數(shù)據(jù)庫驗證的到了相似的結(jié)果。八、膠質(zhì)瘤分子診斷的質(zhì)控 分子遺傳學和分子生物學的技術(shù)進展，將膠質(zhì)瘤的診治水準提升到了分子水平，同時也對腫瘤樣本的質(zhì)量提出了更高的要求。因此，腫瘤樣本的質(zhì)量控制是包括膠質(zhì)瘤在內(nèi)的所有腫瘤臨床樣本分子診斷過程中的基本環(huán)節(jié)。根據(jù)膠質(zhì)瘤術(shù)程長、易復發(fā)、異質(zhì)性高等特點，在進行分子診斷檢測之前，應(yīng)當從以下幾個方面進行質(zhì)控。 1．標準操作程序( standard operation procedure，SOP)和臨床實踐指南( clinical practice guideline，CPG)。一旦膠質(zhì)瘤樣本離開患者身體后，由于缺乏必需的生存環(huán)境，必然發(fā)生組織降解，使其內(nèi)部的生物分子發(fā)生降解，導致生物信息改變、甚至丟失，從而降低樣本的可利用價值。樣本降解的速度與很多因素( pre-analytical variables)有關(guān)，需要檢測的目的生物分子對致降解因素的易感性也各不相同。因而，嚴格執(zhí)行SOP與CPG，在分子診斷中將人為影響和環(huán)境因素的作用降到最低，才能最大限度地維持所檢分子的完整性，確保膠質(zhì)瘤分子診斷的準確性。2．個體化分析：需要指出的是患者自身體質(zhì)、腫瘤血運分布、腫瘤細胞組成等個體因素可以對單個膠質(zhì)瘤標本的降解速度的影響不盡相同；因此，在臨床操作中，應(yīng)當對每例患者樣本的取材方法、冷凍時間、保存運輸條件等諸多分子診斷前數(shù)據(jù)做個體化分析。推薦對各例樣本進行降解程度評估，用以校正分子診斷結(jié)果。對經(jīng)歷放、化療的患者，做分子診斷時應(yīng)當考慮放、化療等因素對所檢分子的影響，并區(qū)別放化療因素造成膠質(zhì)瘤的繼發(fā)性分子變化。3．推薦的精細化的分子診斷：首先，考慮到膠質(zhì)瘤的異質(zhì)性，不宜將整塊腫瘤組織一同勻漿進行分子分析；而應(yīng)當對每例待檢樣本進行病理切片和組織學觀察。根據(jù)組織形態(tài)學特點，必要時應(yīng)當在顯微鏡下（石蠟切片）或冰凍切片機上（冰凍切片）對細胞進行選擇性收集( selective tissuedissection)。4．本版本提出的膠質(zhì)瘤分子診斷指南是在基因水平（包括DNA、mRNA和miRNA）所做的定性分析，無法獲知具有基因分子特征的細胞在所檢膠質(zhì)瘤組織中的比例和分布情況，因而在根據(jù)這些基因特征選擇治療方案和預后分析時可能出現(xiàn)偏差。為了提高膠質(zhì)瘤分子診斷水準、最終實現(xiàn)精確精準治療的目的，適時研發(fā)并優(yōu)化以RNA、蛋白質(zhì)為標準的定量分子診斷手段，條件允許的時候利用諸如靶向蛋白定量質(zhì)譜之類的先進技術(shù)手段對膠質(zhì)瘤進行量化的分子診斷，是膠質(zhì)瘤分子診斷的最終目標與方向。

顱咽管瘤起源于垂體胚胎發(fā)生過程中殘存的扁平上皮細胞，是一種常見的先天性顱內(nèi)良性腫瘤，手術(shù)切除仍是目前治療顱咽管瘤的主要手段，但手術(shù)難度不小，是神經(jīng)外科手術(shù)最難的之一。對大部分病人，手術(shù)是可以做到全切除的。最近連續(xù)做了幾個顱咽管瘤的全切除，體會到以前一位大家所說的“顱咽管瘤的切除，只有夠不著的技術(shù)，沒有全切不了的”。以前的殘留大多為鞍內(nèi)及垂體柄的殘留，術(shù)后輔助以伽瑪?shù)吨委?，部分病例仍然難以控制。隨著顯微技術(shù)和顯微設(shè)備器械的改進，以及手術(shù)經(jīng)驗的積累，對大多數(shù)顱咽管瘤是可以做到全切除的。